Fordele og ulemper ved laserscanningsmikroskopi
Fordelene er som følger:
1. Ophidset af rødt eller infrarødt lys er lysspredning lille (spredningen af små partikler er omvendt proportional med bølgelængdens fjerde potens).
2. Intet behov for nålehuller, i stand til at indsamle flere spredte fotoner fra det billeddannende tværsnit.
3. Pinholes kan ikke skelne spredte fotoner udsendt fra defokuserede eller fokale områder, og multifotoner har bedre signal-til-støj-forhold i dyb billeddannelse.
4. Det ultraviolette eller synlige lys, der bruges til excitation af en enkelt foton, absorberes let og dæmpes af prøven, før strålen når brændplanet, hvilket gør det vanskeligt at excitere dybe lag.
5. Med hensyn til biologisk mikroskopi-observation er den første overvejelse ikke at beskadige selve organismens aktive tilstand og at opretholde cirkulationen af vand, ionkoncentration, oxygen og næringsstoffer. Inden for lysobservation skal både termisk energi og fotonenergi forblive inden for bestrålingsdosis og lysenergi, der ikke beskadiger celler.
6. Multifotonmikroskopi har også mange fordele. Med hensyn til tredimensionel opløsning, dybdeinvasion, spredningseffektivitet, baggrundslys, signal-til-støj-forhold, kontrol osv., har lasermikroskoper uovertrufne eller overlegne egenskaber, som tidligere lasermikroskoper ikke havde.
Multifoton konfokal laser scanningsmikroskopi er blevet udvidet til forskellige forsknings- og anvendelsesområder, den kan udføre tredimensionel ikke-destruktiv observation på prøver i deres naturlige tilstand og forbedre opløsningen og signal-til-støj-forholdet i systemet. Ved at udnytte ændringerne i materialeegenskaber efter multifoton-excitation kan den også opnå tredimensionel højdedatalagring og tredimensionel mikrobehandling i enhver retning, hvilket har høj anvendelsesværdi. Det kan antages, at med den videre udvikling af mekanisk, materiale , og laserteknologier relateret til multifoton konfokal mikroskopi, vil multifoton konfokal laser scanningsmikroskopi have større udvikling og bredere anvendelser
Ulemperne er som følger:
1. Kun til fluorescensbilleddannelse.
2. Hvis prøven indeholder kromoforer, der kan absorbere excitationslys, såsom pigmenter, kan prøven blive udsat for termisk beskadigelse.
3. Opløsningen er lidt reduceret, selvom den kan forbedres ved samtidig at bruge konfokale små huller, vil der være signaltab.
4. På grund af begrænsningerne ved dyre ultrahurtige lasere er omkostningerne ved multifoton scanningsmikroskoper relativt høje.
