Forskellen mellem fluorescensmikroskop og laserkonfokalmikroskop
fluorescerende mikroskop
1. Fluorescensmikroskopet bruger ultraviolet lys som lyskilde, som bruges til at bestråle det detekterede objekt for at få det til at udsende fluorescens, og derefter observere objektets form og position under mikroskopet. Fluorescensmikroskop bruges til at studere absorption, transport, fordeling og placering af kemiske stoffer i celler. Nogle stoffer i celler, såsom klorofyl, kan fluorescere efter at være blevet bestrålet af ultraviolette stråler; Andre stoffer kan ikke fluorescere af sig selv, men de kan fluorescere efter at være blevet farvet med fluorescerende farvestoffer eller fluorescerende antistoffer og bestrålet med ultraviolette stråler. Fluorescensmikroskop er et af værktøjerne til kvalitativ og kvantitativ forskning i disse stoffer.
2, fluorescensmikroskop princip:
(a) Lyskilde: Lyskilden udstråler lys af forskellige bølgelængder (fra ultraviolet til infrarødt).
(b) Excitationsfilterlyskilde: transmitterer lys med en specifik bølgelængde, der kan få prøven til at fluorescere, mens den blokerer lys, der er ubrugeligt til excitationsfluorescens.
(c) Fluorescerende prøver: generelt farvet med fluorescerende pigmenter.
(d) Blokerende filter: blokerer excitationslys, der ikke absorberes af prøven til selektivt at transmittere fluorescens, og nogle bølgelængder i fluorescensen transmitteres også selektivt. Et mikroskop, der bruger ultraviolet lys som lyskilde til at få det bestrålede objekt til at udsende fluorescens. Elektronmikroskopet blev første gang samlet af Knohl og Ha Roska i Berlin i 1931. Dette mikroskop bruger en højhastigheds elektronstråle i stedet for en lysstråle. Fordi elektronstrømmens bølgelængde er meget kortere end lysbølgens, kan forstørrelsen af elektronmikroskop nå op på 800 tusind gange, og den mindste opløsningsgrænse er 0,2 nanometer. Scanningelektronmikroskopet, som begyndte at blive brugt i 1963, kan få folk til at se de små strukturer på overfladen af objekter.
3. Anvendelsesområde: bruges til at forstørre billedet af små objekter. Det anvendes generelt til observation af biologi, medicin og mikroskopiske partikler.
Konfokalt mikroskop
1. Konfokalmikroskop tilføjer en semi-reflekterende semi-linse på den optiske vej af reflekteret lys, som bryder det reflekterede lys, der er passeret gennem linsen til andre retninger. Ved dens fokus er der en baffel med et nålehul, og nålehullet er placeret ved fokus. Bag baflen er et fotomultiplikatorrør. Man kan forestille sig, at det reflekterede lys før og efter detektionslysets fokus passerer gennem dette konfokale system, og vil ikke blive fokuseret på det lille hul, men vil blive blokeret af baflen. Så fotometeret måler intensiteten af reflekteret lys ved fokus.
2. Princip: Det traditionelle optiske mikroskop bruger feltlyskilden, og billedet af hvert punkt på prøven vil blive forstyrret af diffraktionen eller det spredte lys fra de tilstødende punkter; Det konfokale laserscanningsmikroskop scanner hvert punkt i brændplanet i prøven ved at bruge punktlyskilden dannet af laserstrålen, der passerer gennem belysningsnålhullet. Det bestrålede punkt på prøven afbildes ved detektionsnålhullet, som modtages punkt for punkt eller linje for punkt af fotomultiplikatorrør (PMT) eller koldkoblet enhed (cCCD) efter detektering af nålehullet, og et fluorescerende billede dannes hurtigt på computerskærmen. Belysningsnålehullet og detektionsnålehullet er konjugerede med hensyn til objektivlinsens brændplan, og punkterne på brændplanet fokuserer på belysningsnålehullet og emissionsnålehullet på samme tid, og punkterne uden for brændplanet vil ikke afbildes ved detektionsnålehullet, således at det opnåede konfokale billede er det optiske tværsnit af prøven, som overvinder defekten med sløret billede af det almindelige mikroskop.
3. Anvendelsesområder: involverer medicin, dyre- og planteforskning, biokemi, bakteriologi, cellebiologi, væv og embryo, fødevarevidenskab, genetik, farmakologi, fysiologi, optik, patologi, botanik, neurovidenskab, havbiologi, materialevidenskab, elektronisk videnskab, mekanik, petroleumsgeologi og mineralogi.
