Forskellen mellem fluorescensmikroskop og almindeligt optisk mikroskop
Fluorescensmikroskop og almindeligt optisk mikroskop forskel, fluorescensmikroskop og almindeligt optisk mikroskop er forskelligt, det er ikke gennem belysningen af den almindelige lyskilde at observere prøven, men brugen af en vis bølgelængde af lys (normalt ultraviolet, blå-violet) excitation af prøven under mikroskopet inde i det fluorescerende materiale, så den udsender fluorescerende lys, så fluorescensmikroskopets rolle i lyskilden er ikke en direkte belysning, men som en slags stimulering af prøver af fluorescensen i det indre Lyset kilden til fluorescensmikroskopet er ikke en direkte belysning, men som en energikilde til at stimulere det fluorescerende stof inde i prøven. Grunden til, at vi kan observere prøven, skyldes ikke belysningen af lyskilden, men det fluorescensfænomen, der præsenteres af det fluorescerende stof i prøven efter at have absorberet den exciterede lysenergi. Det kan ses, at karakteristikaene ved fluorescensmikroskopet hovedsageligt er, at dets lyskilde kan levere et stort antal specifikke bølgelængdeområder af excitationslys, således at de fluorescerende stoffer i den undersøgte prøve kan opnå den nødvendige intensitet af excitationslys. Samtidig skal fluorescensmikroskopet have et tilsvarende filtersystem. Fluorescensmikroskopet er det grundlæggende værktøj til **fluorescenshistokemi. Det er sammensat af ultrahøjtrykslyskilde, filtersystem (herunder excitations- og undertrykkelsesfilterplade), optisk system og fotografisk system og andre hovedkomponenter, er brugen af en vis bølgelængde af lys til at stimulere prøven til at udsende fluorescens.
1. måden af fluorescens excitation: ifølge bølgelængdeområdet for lys er opdelt i UV excitationsmetode (ved hjælp af ultraviolet belysning) og BV excitationsmetode (ved hjælp af blåt violet lys) to slags UV excitationsmetode er kortere end 400nm nær ultraviolet lys for excitation. Der er intet synligt excitationslys i denne metode, så den observerede fluorescens viser farvestoffets iboende fluorescens, og det er let at skelne den specifikke fluorescens på prøven fra selvfluorescensen af baggrundsvævet.
2. BV excitationsmetode: Metoden er centreret om 404nm, 434nm fra ultraviolet til blåt lys til excitation. Denne metode bruger blåt lys til at bestråle prøven, så cut-off filteret i fluorescensobservationssystemet skal bruge et filter, der fuldstændigt kan blokere det blå lys og helt passere den ønskede grønne og gule fluorescens. Fluorescerende pigmenter til fluorescerende antistofmetoden. Da bølgelængden af den maksimale absorption af excitationslyset og bølgelængden af den maksimale emission af fluorescensen er tæt på hinanden, skal filtrene, der anvendes i BV-excitationsmetoden, være skarpe afskæringsfiltre. Denne metode bruger blåt lys som excitationslys, så fluorokromets absorptionseffektivitet er højere, og et lysere billede kan opnås. Ulempen er, at fluorescens under 500 nm ikke kan ses, og over 500 nm fremstår hele billedet gult. I den fluorescerende antistofmetode bedømmes det meste af specificiteten af farven, der er unik for fluorokromet, så ulemperne ved BV-excitationsmetoden beskrevet ovenfor har en tendens til at være ekstremt indflydelsesrig, når man diskuterer subtil specificitet.
