Fluorescensmikroskopi principper og strukturelle træk
Fluorescensmikroskopi er brugen af en høj luminescenseffektivitet af punktet, gennem filtrering af farvesystemet til at udsende en vis bølgelængde af lys (såsom ultraviolet 3650 ind i eller violet-blå 4200 ind i) som excitationslyset, excitationen af fluorescerende materiale i prøven udsender en række forskellige farver af fluorescens og forstørres derefter gennem objektivet og okularerne til observation. På denne måde, i den stærke kontrast baggrund, selvom fluorescensen er meget svag, er det let at identificere, høj følsomhed, hovedsagelig brugt til undersøgelse af cellestruktur og funktion og kemisk sammensætning. Den grundlæggende struktur af et fluorescensmikroskop er sammensat af et almindeligt optisk mikroskop plus noget tilbehør (såsom en fluorescenslyskilde, excitationsfiltre, tofarvet stråleseparator og blokeringsfiltre osv.). Fluorescerende lyskilde - generelt brugt ultrahøjtrykskviksølvlampe (50-200W), som kan udsende en række forskellige bølgelængder af lys, men hvert fluorescerende materiale har en stærkeste fluorescensexcitationsbølgelængde, så behovet for at tilføje excitationsfiltre (generelt ultraviolet, violet, blåt og grønt excitationsfilter), således at kun en vis bølgelængde af excitationslys gennem bestråling af prøver absorberes, mens det andet lys absorberes. Så det er nødvendigt at tilføje et excitationsfilter (normalt ultraviolette, violette, blå og grønne excitationsfiltre), så kun en vis bølgelængde af excitationslys gennem prøven, mens andet lys absorberes. Når hvert stof bestråles med excitationslys, udsender det synlig fluorescens af en længere bølgelængde end det bestrålede lys inden for meget kort tid. Fluorescens har specificitet, generelt svagere end excitationslyset, for at kunne observere den specifikke fluorescens, skal objektivlinsen bag behovet for at tilføje blokering (eller undertrykkelse) vælges til brug.
Fluorescensmikroskop og almindeligt mikroskop forskel
1. Belysningsmetoden er normalt faldende, det vil sige, at lyskilden projiceres på prøven gennem objektivlinsen;
2. Lyskilden er ultraviolet lys, med en kortere bølgelængde og en højere opløsningsevne end almindelige mikroskoper;
3. Der er to specielle filtre, det ene foran lyskilden bruges til at bortfiltrere synligt lys, og det mellem okularet og objektivlinsen bruges til at filtrere ultraviolet lys fra for at beskytte det menneskelige øje.
Fluorescensmikroskop er også en slags optisk mikroskop, den største forskel er, at excitationsbølgelængden af de to er forskellige. Dette bestemmer fluorescensmikroskopets og det almindelige optiske mikroskops struktur og anvendelse af forskellige metoder.
Fluorescensmikroskop er det grundlæggende værktøj til immunfluorescens cytokemi. Det er sammensat af lyskilde, filterpladesystem og optisk system og andre hovedkomponenter. Den bruger en vis bølgelængde af lys til at stimulere prøven til at udsende fluorescens, som forstørres gennem objektivlinsen og okularsystemet for at observere fluorescensbilledet af prøven.
