Har du nogensinde forstået de grundlæggende principper for fasekontrastmikroskopi?
Fasekontrastmikroskopet blev opfundet af den hollandske videnskabsmand Zernike i 1935 til at observere ufarvede prøver. For levende celler og ufarvede biologiske prøver, på grund af forskellen i brydningsindekset og tykkelsen af mikrostrukturen af hver del af cellen, når lysbølgen passerer igennem, ændres bølgelængden og amplituden ikke, kun fasen ændres (amplitudeforskel) ), som er usynlig for det menneskelige øje. observere. Fasekontrastmikroskopet ændrer faseforskellen og bruger lysdiffraktions- og interferensfænomener til at ændre faseforskellen til en amplitudeforskel for at observere levende celler og ufarvede prøver. Forskellen mellem et fasekontrastmikroskop og et almindeligt mikroskop er, at der anvendes en ringformet membran i stedet for en variabel membran, en objektivlinse med en faseplade anvendes i stedet for en almindelig objektivlinse, og der er et teleskop til koaksialitet.
Grundlæggende principper for fasekontrastmikroskopi:
Ved at bruge forskellen i brydningsindeks og tykkelse mellem forskellige strukturelle komponenter af objektet, konverteres den optiske vejforskel, der passerer gennem forskellige dele af objektet, til forskellen i amplitude (lysintensitet) og gennem kondensatorlinsen med en ringformet membran og faseforskel med en faseplade Objektivlinsen realiserer observationsmikroskopet. Det bruges hovedsageligt til at observere levende celler eller ufarvede vævssnit, og nogle gange kan det også bruges til at observere farvede prøver, der mangler kontrast.
Den optiske vejforskel af det synlige lys, der passerer gennem prøven, ændres til en amplitudeforskel, hvilket forbedrer kontrasten mellem forskellige strukturer og gør forskellige strukturer klart synlige. Lyset brydes efter at have passeret gennem prøven, afviger fra den oprindelige optiske vej og forsinkes med 1/4λ (bølgelængde). Hvis den øges eller formindskes med 1/4λ, bliver den optiske vejforskel 1/2λ, og de to stråler interfererer efter lysaksen. Styrk, øg eller formindsk amplituden, forbedre kontrasten.
Fasekontrastmikroskopet har to funktioner, som andre mikroskoper ikke har: ① det adskiller det direkte lys (baggrundslys i synsfeltet) fra det lys, der afbrydes af objektet; ② den fjerner omkring halvdelen af bølgelængden fra fasen, så den ikke kan interagere, hvilket resulterer i en ændring i intensiteten.
