Hvordan fluorescensmikroskopi adskiller sig fra konfokal lasermikroskopi
Fluorescensmikroskop
1, er fluorescensmikroskop at bruge ultraviolet lys som lyskilde, der bruges til at bestråle det objekt, der skal undersøges, så det udsender fluorescens, og derefter observere objektets form og dets placering under mikroskopet. Fluorescensmikroskop bruges til at studere absorption, transport, distribution og lokalisering af kemiske stoffer i celler. Nogle stoffer i cellen, såsom klorofyl, kan fluorescere efter bestråling med ultraviolet lys; der er nogle stoffer, som ikke kan fluorescere af sig selv, men hvis de farves med fluorescerende farvestoffer eller fluorescerende antistoffer, kan de også fluorescere efter bestråling med ultraviolet lys, og fluorescensmikroskopi er et af værktøjerne til kvalitativ og kvantitativ forskning af denne slags stoffer.
2, fluorescensmikroskop princip:
(A) lyskilde: lyskilden udstråler forskellige bølgelængder af lys (i ultraviolet til infrarødt).
(B) excitationsfilterkilde: gennem prøven kan producere fluorescens af en specifik bølgelængde af lys, mens den blokerer excitationen af fluorescens ubrugeligt lys.
(C) Fluorescerende prøve: generelt farvet med en fluorokrom.
(D) Blokerende filtre: blokerer excitationslys, der ikke absorberes af prøven, for selektivt at transmittere fluorescens, og nogle bølgelængder i fluorescensen transmitteres også selektivt. Et mikroskop, der bruger ultraviolet lys som lyskilde til at få det bestrålede objekt til at fluorescere. Elektronmikroskopet blev først samlet i 1931 i Berlin, Tyskland af Knorr og Haroska. Dette mikroskop bruger en højhastigheds elektronstråle i stedet for en lysstråle. Fordi elektronstrømmens bølgelængde er meget kortere end lysbølgen, så forstørrelsen af elektronmikroskopet kan være op til 800,000 gange, opløsningen af minimumsgrænsen på 0,2 nanometer . 1963 begyndte at bruge scanning elektronmikroskop kan ses på overfladen af objektets lille struktur.
3, anvendelsesområdet: bruges til at forstørre billedet af små objekter. Generelt brugt i biologi, medicin, mikroskopiske partikler og andre observationer.
Konfokalt mikroskop
1, konfokalmikroskop i det reflekterede lys på vejen plus en halvreflekterende halvlinse, vil have været gennem linsen af det reflekterede lys foldet i andre retninger, i dets fokus på en baffel med et nålehul, er hullet placeret i fokus, bag baflen er et fotomultiplikatorrør. Man kan forestille sig, at det reflekterede lys før og efter detektorlysets brændpunkt gennem dette sæt konfokale system, ikke vil være i stand til at fokusere på det lille hul, vil blive blokeret af baffelen. Så fotometeret måler intensiteten af det reflekterede lys i brændpunktet.
2, princip: det traditionelle optiske mikroskop bruger en feltlyskilde, billedet af hvert punkt på prøven vil blive forstyrret af diffraktion eller spredning af lys fra tilstødende punkter; laserscanning konfokalmikroskop bruger en laserstråle gennem det oplysende nålehul til at danne en punktlyskilde på prøven i fokalplanet for scanningen af hvert punkt på prøven, prøven bestråles, i detektionen af nålehullet ved billeddannelsen , ved detektering af pinhole efter fotomultiplikatorrøret (PMT) eller koldelektrokoblingsanordningen (cCCD) punkt for punkt eller punkt for punkt eller punkt for punkt, måles lysintensiteten med et fotometer. cCCD) modtager punkt for punkt eller linje for linje og danner hurtigt et fluorescerende billede på computerskærmen. Belysningsnålehullet og detektionsnålehullet i forhold til objektivlinsens brændplan er konjugeret, punktet på brændplanet fokuserer samtidig på belysningsnålehullet og emissionsnålehullet, punktet uden for brændplanet vil ikke være i detektionsnålehullet kl. billeddannelsen, så det konfokale billede er prøven af det optiske tværsnit, der overvinder manglerne ved de slørede billeder af almindelige mikroskoper.
3,Anvendelsesområder: medicin, dyre- og planteforskning, biokemi, bakteriologi, cellebiologi, vævsembryologi, fødevarevidenskab, genetik, farmakologi, fysiologi, optik, patologi, botanik, neurovidenskab, marinbiologi, materialevidenskab, elektronisk videnskab, mekanik, petroleumsgeologi, mineralogi.
