Hvordan vælger man mellem omvendt mikroskop og fluorescensmikroskop?
Mikroskop er et vigtigt instrument i cellekultur og relaterede derivateksperimenter. På nuværende tidspunkt findes der forskellige typer mikroskoper på markedet, og det er en udfordring at vælge et mikroskop, der opfylder behovene og er egnet. Nedenfor vil vi introducere principperne for inverterede mikroskoper og fluorescensmikroskoper, som alle kan vælge imellem.
Det omvendte mikroskop består ligesom et almindeligt mikroskop hovedsageligt af tre dele: mekanisk del, belysningsdel og optisk del. Sammensætningen af et omvendt mikroskop er den samme som i et almindeligt opretstående mikroskop, bortset fra at objektivlinsen og lyssystemet er omvendt, med det første under scenen og det sidste over scenen. Denne struktur udvider markant den effektive afstand mellem belysningsspot-systemet og scenen, hvilket gør det nemmere at placere tykkere observationsværktøjer såsom kulturskåle og cellekulturflasker (selvfølgelig kan glasglas også bruges), mens arbejdsafstanden mellem objektivlinse og materialet behøver ikke at være særlig stort. Inverteret mikroskop bruges af medicinske og sundhedsmæssige institutioner, universiteter og forskningsinstitutter til at observere mikroorganismer, celler, bakterier, vævskulturer, suspensioner, sedimenter osv. Det kan kontinuerligt observere processen med celle- og bakterieproliferation og -deling i dyrkningsmediet, og kan fange enhver form for denne proces. Udbredt inden for områder som cytologi, parasitologi, onkologi, immunologi, genteknologi, industriel mikrobiologi og botanik.
Fluorescensmikroskopi bruges til at studere absorption, transport, distribution og lokalisering af stoffer i celler. For det testede objekt er der to måder at generere fluorescens på: spontan fluorescens, som udsendes direkte af ultraviolet bestråling; Sekundær fluorescens opstår, når det observerede objekt behandles med fluorescerende farvestoffer og udsættes for ultraviolet lys, før det udsender fluorescens. Nogle stoffer i celler, såsom klorofyl, producerer spontan fluorescens efter at være blevet udsat for ultraviolet stråling; Nogle stoffer udsender muligvis ikke selv fluorescens, men hvis de farves med fluorescerende farvestoffer eller fluorescerende antistoffer, kan de også udsende sekundær fluorescens under ultraviolet stråling. Et fluorescensmikroskop bruger en punktlyskilde med høj lyseffektivitet til at udsende en vis bølgelængde af lys (UV 365nm eller UV blå 420nm) gennem et farvefiltreringssystem som excitationslys, der exciterer de fluorescerende stoffer i prøven til at udsende forskellige farver af fluorescens. Derefter observeres det gennem forstørrelse af objektivlinsen og okularet. På denne måde er den, selv med svag fluorescens, let genkendelig og meget følsom under stærke kontrasterende baggrunde. Det bruges hovedsageligt til at studere cellestruktur, funktion og kemisk sammensætning.
Fluorescensmikroskopi kan opdeles i to typer: transmissionstype og faldende type. Førstnævnte er mere primitiv, mens sidstnævnte er mere avanceret. Den grundlæggende konstruktion af de to typer fluorescensmikroskoper er ens, med den største forskel er, at det transmitterede excitationslys passerer gennem prøven og producerer fluorescens som helhed. Fluorescensen kommer derefter ind i objektivlinsen, og jo højere forstørrelsen er, jo svagere er fluorescensen; Det faldende excitationslys projicerer på overfladen af prøven og producerer fluorescens, der kommer ind i objektivlinsen. Jo højere forstørrelsen er, jo stærkere er fluorescensen, hvilket gør den velegnet til observation med høj effekt. Hovedkomponenterne i et fluorescensmikroskop inkluderer en kviksølvlampe-lyskilde, en excitationsfilterplade, et spektrofotometer (dråbetype), en undertrykkelsesfilterplade og en mørkfeltskondensator (transmissionstype). På grund af den alvorlige opvarmning af kviksølvlamper er de fleste af dem desuden udstyret med varmeabsorberende filtre. Nogle fluorescensmikroskoper har også et fasekontrastobjektiv og en cirkulær blænde, hvilket giver mulighed for fasekontrastobservation. Nogle fluorescensmikroskoper vedtager en omvendt struktur, som også er et omvendt mikroskop, og så videre.
Derudover kan de ovennævnte mikroskoper samles til digitale mikroskoper ved at installere CCD, som konverterer de fysiske billeder, der ses af mikroskopet, til digitale analoge billeder og afbilder dem på en computer. Som et resultat kan vi flytte vores forskning på mikroområdet fra traditionel kikkertobservation til reproduktion gennem displays og derved forbedre arbejdseffektiviteten.
