Introduktion til at vælge mellem omvendte mikroskoper og fluorescensmikroskoper
Mikroskop er et vigtigt instrument i cellekultur og relaterede derivateksperimenter. På nuværende tidspunkt findes der forskellige typer mikroskoper på markedet, og det er en udfordring at vælge et mikroskop, der opfylder behovene og er egnet. Nedenfor vil vi introducere principperne for inverterede mikroskoper og fluorescensmikroskoper for nem udvælgelse.
Sammensætningen af et omvendt mikroskop er den samme som et almindeligt mikroskop, hovedsagelig bestående af tre dele: mekanisk del, belysningsdel og optisk del. Sammensætningen af et inverteret mikroskop er den samme som et almindeligt opretstående mikroskop, bortset fra at objektivlinsen og belysningssystemet er omvendt, med førstnævnte under scenen og sidstnævnte over scenen. Denne struktur giver mulighed for en betydelig forøgelse af den effektive afstand mellem belysningsfokuseringssystemet og scenen, hvilket gør det lettere at placere tykkere observationsinstrumenter såsom dyrkningsskåle og cellekulturflasker (selvfølgelig er glasglas også acceptable), mens arbejdsafstanden mellem objektivlinsen og materialet ikke behøver at være særlig stor. Inverteret mikroskop bruges af medicinske og sundhedsinstitutioner, universiteter og forskningsinstitutter til at observere mikroorganismer, celler, bakterier, vævskultur, suspensioner, sedimenter osv. Det kan kontinuerligt observere processen med celle- og bakteriel reproduktion og deling i dyrkningsmediet, og kan fange enhver tilstand under denne proces. Udbredt inden for områder som cytologi, parasitologi, onkologi, immunologi, genteknologi, industriel mikrobiologi, botanik osv.
Fluorescensmikroskopi bruges til at studere absorption, transport, distribution og lokalisering af stoffer i celler. For det testede objekt er der to måder at generere fluorescens på: spontan fluorescens, som direkte udsender fluorescens efter UV-bestråling; Sekundær fluorescens opstår, når det observerede objekt behandles med fluorescerende farvestoffer og derefter bestråles med ultraviolet lys for at udsende fluorescens. Nogle stoffer i celler, såsom klorofyl, producerer spontan fluorescens, når de udsættes for ultraviolet stråling; Nogle stoffer kan ikke selv udsende fluorescens, men hvis de farves med fluorescerende farvestoffer eller fluorescerende antistoffer, kan de også udsende sekundær fluorescens efter at være blevet bestrålet med ultraviolet lys. Fluorescensmikroskop bruger en meget effektiv punktlyskilde til at udsende en vis bølgelængde af lys (ultraviolet lys 365nm eller lilla blåt lys 420nm) gennem et farvefiltersystem som excitationslys, der exciterer de fluorescerende stoffer inde i prøven til at udsende forskellige farver af fluorescens gennem objektivet og derefter observere øjestykket. På denne måde, selv med svag fluorescens i en stærk baggrund, er den let at genkende og har høj følsomhed. Det bruges hovedsageligt til undersøgelse af cellestruktur, funktion og kemisk sammensætning.
