Introduktion til multifoton laser scanning mikroskopi: fordele og ulemper
1. Ophidset af rødt eller infrarødt lys er lysspredning lille, og spredningen af små partikler er omvendt proportional med bølgelængdens fjerde potens.
2. Mere spredte fotoner fra det billeddannende tværsnit kan opsamles uden behov for nålehuller.
3. Pinholes kan ikke skelne spredte fotoner udsendt fra defokuserede eller fokale områder, og multifotoner har bedre signal-til-støj-forhold i dyb billeddannelse.
4. Det ultraviolette eller synlige lys, der bruges til excitation af en enkelt foton, absorberes let og dæmpes af prøven, før strålen når brændplanet, hvilket gør det vanskeligt at excitere dybe lag.
5. Med hensyn til biologisk mikroskopiobservation er den første overvejelse ikke at beskadige selve organismens aktive tilstand, opretholde cirkulationen af vand, ionkoncentration, oxygen og næringsstoffer. Inden for lysobservation skal både termisk energi og fotonenergi forblive inden for bestrålingsdosis og lysenergi, der ikke beskadiger celler.
6. Multifotonmikroskopi har mange fordele. Med hensyn til tredimensionel opløsning, dybdeinvasion, spredningseffektivitet, baggrundslys, signal-til-støj-forhold, kontrol osv., er der karakteristika, som tidligere lasermikroskoper ikke besidder eller ikke kan overgå
Ulemper ved multifoton laser scanning mikroskop:
1. Kun til fluorescensbilleddannelse.
2. Hvis prøven indeholder kromoforer, der kan absorbere excitationslys, kan prøven blive udsat for termisk skade.
3. Opløsningen er lidt reduceret, selvom den kan forbedres ved samtidig at bruge konfokale små huller, er der signaltab.
4. På grund af begrænsningerne ved dyre ultrahurtige lasere er omkostningerne ved multifoton scanningsmikroskoper relativt høje.
