Introduktion til fordele og ulemper ved multi-foton laserskanningsmikroskopi
1.. Spændt af rødt eller infrarødt lys, lysspredning er lille, og spredningen af små partikler er omvendt proportional med den fjerde effekt i bølgelængden.
2.. Mere spredte fotoner fra billeddannelsestværsnittet kan indsamles uden behov for pinholes.
3. pinholes kan ikke skelne spredte fotoner, der udsendes fra defokuserede eller fokale områder, og multifotoner har bedre signal-til-støjforhold i dyb billeddannelse.
4.. Det ultraviolette eller synlige lys, der bruges til enkelt foton -excitation, absorberes let og svækkes af prøven, før bjælken når fokusplanet, hvilket gør det vanskeligt at begejstre dybe lag.
5. Med hensyn til biologisk mikroskopiobservation er den første overvejelse at ikke skade den aktive tilstand af selve organismen, vedligeholde cirkulationen af vand, ionkoncentration, ilt og næringsstoffer. Inden for let observation skal både termisk og fotonenergi forblive inden for bestrålingsdosis og lysenergi, der ikke skader celler.
6. Multiphoton -mikroskopi har mange fordele. Med hensyn til tredimensionel opløsning, dybdeinvasion, spredningseffektivitet, baggrundslys, signal-til-støjforhold, kontrol osv., Er der egenskaber, som tidligere lasermikroskoper ikke har eller ikke kan overgå
Ulemper ved multiphoton -laserskanningsmikroskop:
1. kun til fluorescensafbildning.
2. Hvis prøven inkluderer kromoforer, der kan absorbere excitationslys, kan prøven blive udsat for termisk skade.
3. Opløsningen reduceres lidt, selvom den kan forbedres ved samtidig at bruge konfokale små huller, er der signaltab.
4. På grund af begrænsningerne af dyre ultrahastede lasere er omkostningerne ved multiphoton -scanningsmikroskoper relativt høje.
