Fremgangsmåder til fremstilling af prøver til optisk og elektronmikroskopi af film
Mikrofilmmetoden omfatter generelt fire kategorier: skæringsmetode, overordnet forseglingsmetode, belægningsmetode og pressemetode.
① Skivemetode. Optisk mikroskop skivetykkelse mellem 2 til 25 mikron, generelle plante-og dyrematerialer, skiven er omkring 10 mikron tyk er passende. Sektionsmetoden varierer alt efter de forskellige indlejringsmidler. Almindeligvis anvendte er paraffinsektioneringsmetoden, bomuldslimsektioneringsmetoden, frossensektioneringsmetoden og glycolmethacrylatmetoden (benævnt GMA-metoden). Paraffinsektionsmetoden omfatter trinene fiksering, indlejring, sektionering, farvning, dehydrering og forsegling. Nøglen er at indlejre biomaterialet i paraffinvoks og bruge paraffinvoks som støtte til at skære biomaterialet nedsænket i voksblokken i ideelle tynde skiver. Operationsprocessen er som følger: fiksering → vandvask → trin-for-trin fra lav til høj koncentration alkoholdehydrering → xylen-transparens → voksnedsænkning → indstøbning → sektionering → lapning → xylen-afvoksning → trin-for-trin fra høj til lav koncentration alkoholbehandling, og til sidst overgang til vand → farvning → trin-for-trin fra lav til høj koncentration alkohol dehydrering → xylen gennemsigtighed → forsegling med harpiks klæbemiddel. De involverede grundlæggende trin er de samme i alle former for filmfremstillingsteknikker.
② Integral tætningsmetode. Anvendes til enkeltceller, bittesmå organismer eller spredte organer i helmonteret filmmetoden. Denne metode kræver også forskellige trin af fiksering, farvning, dehydrering, gennemsigtighed og forsegling. Denne metode bruges til fremstilling af munddele af snørevinger og insekter.
Smøre metode. En fremstillingsmetode, hvor en let dispergeret biologisk prøve overtrækkes på et objektglas. Blodudstrygning er et eksempel.
④Trykningsmetode. Det naturlige, let dispergerede væv eller let spredte væv efter behandling, såsom dyrespermatocytter, rodspidsceller osv. på objektglasset, plus et dækglas, og derefter kraftigt knuse vævene, så cellerne eller intracellulære strukturer spredes til et lag af filmmetoder. Pressemetoden bruges ofte til at observere kromosomer, normalt farvet med magentaacetat, lavrød og karbolsyrerød.
