Principper og strukturelle træk ved fluorescensmikroskop
Fluorescensmikroskop bruger en meget effektiv punktlyskilde til at udsende en bestemt bølgelængde af lys (såsom ultraviolet lys 3650 eller lilla blå lys 4200) gennem et farvefiltersystem som excitationslys, der begejstrer fluorescerende stoffer i prøven for at udsende forskellige farver af fluorescens og derefter observerer gennem forstørrelsen af de objektive lens og eyeepiece. På denne måde, selv med svag fluorescens i en stærk baggrund, er det let at genkende og har høj følsomhed. Det bruges hovedsageligt til undersøgelse af cellestruktur, funktion og kemisk sammensætning. Den grundlæggende struktur af et fluorescensmikroskop er sammensat af et regelmæssigt optisk mikroskop og noget tilbehør, såsom en fluorescerende lyskilde, excitationsfilter, dobbeltfarvestråleplitter og blokeringsfilter. Fluorescerende lyskilde - bruger normalt ultrahøjt tryk kviksølvlamper (50-200 W), som kan udsende lys af forskellige bølgelængder, men hvert fluorescerende stof har en excitationslysbølgelængde, der producerer stærk fluorescens. Derfor skal excitationsfiltre (normalt ultraviolette, lilla, blå og grønne excitationsfiltre) tilføjes for kun at give en bestemt bølgelængde af excitationslys mulighed for at passere og bestråle prøven, mens det absorberer alt andet lys. Efter at have været bestrålet af excitationslys udsender hvert stof synlig fluorescens med en bølgelængde længere end bestrålingsbølgelængden i en meget kort periode. Fluorescens har specificitet og er generelt svagere end excitationslys. For at observere specifik fluorescens skal der tilsættes et blokerende (eller undertrykkende) filter, der skal tilføjes bag den objektive linse. Dens funktioner er todelt: For det første at absorbere og blokere excitationslys fra at komme ind i okularet for at undgå forstyrrende fluorescens og beskadige øjnene; For det andet at vælge og tillade specifik fluorescens at passere, udviser en bestemt fluorescerende farve. To typer filtre skal bruges i kombination.
