Syv observationsmetoder af mikroskop
Lysfeltsmikroskopi er en velkendt mikroskopisk undersøgelsesmetode, som er meget brugt i patologi, inspektion og observation af farvede snit. Alle mikroskoper kan udføre denne funktion.
2. Mørkt felt DF
Darkfield er faktisk darkfield-belysning. Dens egenskaber er forskellige fra dem for lyst felt. Den observerer ikke direkte belysningens lys, men observerer lyset, der reflekteres eller diffrakteres af objektet under inspektion. Derfor bliver synsfeltet en mørk baggrund, mens objektet under inspektion præsenterer et lyst billede.
Princippet om mørkt felt er baseret på Tyndall-fænomenet i optik. Når støvet passeres direkte af stærkt lys, kan det menneskelige øje ikke observere det, hvilket er forårsaget af diffraktion af stærkt lys. Hvis lyset kastes skråt på det, på grund af lysets reflektion, ser partiklen ud til at vokse i størrelse og er synlig for det menneskelige øje.
Et særligt tilbehør, der kræves til mørkefeltsobservation, er en mørkfeltskondensator. Dens karakteristika er, at den ikke tillader lysstrålen at passere gennem objektet fra bund til top, men ændrer lysets vej, så den skyder skråt ind mod objektet, så det oplysende lys ikke kommer direkte ind i objektivlinsen, og bruger det reflektions- eller diffraktionslys, der dannes af objektets overflade. Lyst billede. Opløsningen for observation af mørkt felt er meget højere end for observation af lyst felt, op til {{0}}.02—0,004
3. Fasekontrast PH
Under udviklingen af optiske mikroskoper er den succesrige opfindelse af fasekontrastmikroskopi en vigtig bedrift inden for moderne mikroskopiteknologi. Vi ved, at det menneskelige øje kun kan skelne lysbølgernes bølgelængde (farve) og amplitude (lysstyrke). For farveløse og gennemsigtige biologiske prøver, når lyset passerer igennem, ændres bølgelængden og amplituden lidt, og det er vanskeligt at observere prøven i lysfeltobservation. .
Fasekontrastmikroskopet bruger den optiske vejforskel af objektet, der skal inspiceres, det vil sige, bruger effektivt lysinterferensfænomenet til at ændre faseforskellen, der ikke kan opløses af det menneskelige øje til en opløselig amplitudeforskel, selv for farveløs og transparent stoffer. blive tydeligt synlige. Dette letter i høj grad observationen af levende celler, så fasekontrastmikroskopi er meget udbredt i inverterede mikroskoper.
Det grundlæggende princip for fasekontrastmikroskopet er at ændre den optiske vejforskel af det synlige lys, der passerer gennem prøven, til en amplitudeforskel, og derved forbedre kontrasten mellem forskellige strukturer og gøre forskellige strukturer klart synlige. Lyset brydes efter at have passeret gennem prøven, afviger fra den oprindelige optiske vej og forsinkes med 1/4λ (bølgelængde) på samme tid. Hvis den øges eller formindskes med 1/4λ, bliver den optiske vejforskel 1/2λ, og de to stråler interfererer efter den optiske akse. Styrk, øg eller mindsk amplituden, forbedre kontrasten. Med hensyn til struktur har fasekontrastmikroskoper to særlige egenskaber, der adskiller sig fra almindelige optiske mikroskoper:
1. Den ringformede membran er placeret mellem lyskilden og kondensatoren, og dens funktion er at få lyset, der passerer gennem kondensatoren, til at danne en hul lyskegle og fokusere det på prøven.
2. Ringformet faseplade En faseplade belagt med magnesiumfluorid tilsættes objektivlinsen, som kan forsinke fasen af direkte lys eller diffrakteret lys med 1/4λ. Opdelt i to typer:
En faseplade: Forsink det direkte lys med 1/4λ, tilføj lysbølgerne, efter at de to grupper af lysbølger er kombineret, og øg amplituden, prøvestrukturen er lysere end det omgivende medium og danner en lys kontrast (eller negativ kontrast) .
Fase B-plade: Forsink det diffrakterede lys med 1/4λ, lysbølgerne fra de to lysgrupper trækkes fra, efter at aksen er justeret, og amplituden bliver mindre og danner en mørk kontrast (eller positiv kontrast), og strukturen er mørkere end det omgivende medium
Fire. Differential interferens kontrast DIC
Differentiel interferensmikroskopi dukkede op i 1960'erne. Det kan ikke kun observere farveløse og gennemsigtige objekter, men også vise en tredimensionel følelse af lettelse og har nogle fordele, som fasekontrastmikroskopi ikke kan opnå. Observationseffekten er endnu bedre. naturtro.
princip;
Differentiel interferens kaldet mikroskopi er brugen af et specielt Wollaston-prisme til at opdele lysstrålen. Vibrationsretningerne for de splittede stråler er vinkelrette på hinanden, og intensiteten er ens, og strålerne passerer gennem objektet på to punkter, der er meget tæt på hinanden, og der er en lille forskel i fase. Da den delte afstand mellem de to lysstråler er ekstremt lille, er der ikke noget dobbelt billedfænomen, så billedet giver en tredimensionel tredimensionel følelse.
