Stereo fluorescens mikroskop brug og forholdsregler
Instruktioner:
(1) Placer materialearket på scenen.
(2) Tænd for spændingsstabilisatoren på det fluorescerende mikroskop. Tryk derefter på startgruppen for at tænde UV-lampen og sluk den ikke inden for 15 minutter, og start den ikke igen inden for 3 minutter efter at den er slukket.
(3) Drej excitationsfilteret til v, farveseparationsfilteret til v, og vælg et 495 eller 475nm blokeringsfilter.
(4) Vælg uvFL40, uvFL100 fluorescerende objektivmikroskop til mikroskopisk undersøgelse.
(5) Tilføj ikke-fluorescerende olie på objektglasset, brug først 40 x, og brug derefter 100 x fokusmikroskop til at kontrollere. Fluorescens vises.
(7) Da fluorescerende stoffers fluorescens gradvist svækkes med tiden, når de bestråles med ultraviolet lys, bør synsfeltet ændres hyppigt under mikroskopisk undersøgelse.
(8) uvFL10 eller uvFL20 mikroskoper med lav forstørrelse kan også bruges til at inspicere materialer (der tilsættes ingen fluorescerende olie ved brug af linser med lav effekt).
Optagelsesmetode for fluorescensbillede:
Fluorescensbilledet set af fluorescensmikroskopet har både morfologiske karakteristika og fluorescensfarve og lysstyrke. Når man bedømmer resultaterne, skal de to kombineres for en omfattende vurdering. Resultaterne registreres baseret på subjektive indikatorer, det vil sige visuel observation af arbejdere. Som en generel kvalitativ observation, grundlæggende pålidelig. Med udviklingen af teknologi og videnskab bruges objektive indikatorer til at registrere bedømmelsesresultater i varierende grad, såsom cellespektrofotometre, billedanalysatorer og andre instrumenter. De resultater, der registreres af disse instrumenter, skal dog også kombineres med subjektive vurderinger.
Fluorescensmikroskopfotografering er meget nødvendig for optagelse af fluorescensbilleder. Da fluorescens er let at falme og svække, er det nødvendigt at registrere resultaterne i realtid. Metoden er grundlæggende den samme som ved almindelig fotomikrografi. Du skal blot bruge højhastigheds-lysfølsom film såsom ASA200 eller derover eller 24. over. Fordi ultraviolet lys har en stærk effekt på fluorescensslukning, såsom FITC-markører, vil fluorescenslysstyrken falde med 50 procent, når den bestråles med ultraviolet lys i 30 sekunder. Hvis eksponeringshastigheden er for langsom, kan det fluorescerende billede derfor ikke tages. Generelle forskningsfluorescensmikroskoper har semi-automatiske eller fuldautomatiske fotomikrografisystemenheder.
Forholdsregler:
(1) Arbejd strengt i overensstemmelse med kravene i fluorescensmikroskopets fabriksinstruktioner, og skift ikke programmet efter behag.
(2) Inspektion skal udføres i et mørkt rum. Når du er kommet ind i mørkerummet, skal du tilslutte strømforsyningen og tænde ultrahøjtryks-kviksølvlampen i 5-15 minutter. Efter at det stærke lys fra lyskilden er stabilt, tilpasses øjnene fuldstændigt til mørkerummet, og begynder derefter at observere prøven.
(3) For at forhindre ultraviolette stråler i at beskadige øjnene, skal der bæres beskyttelsesbriller, når lyskilden justeres.
(4) Inspektionstiden er fortrinsvis 1-2 timer hver gang. Hvis den overstiger 90 minutter, vil lysstyrken af ultrahøjtrykskviksølvlampen gradvist falde, og fluorescensen svækkes; efter at prøven er bestrålet med ultraviolette stråler i 3-5 minutter, vil fluorescensen også være væsentligt svækket; derfor bør det højst ikke overstige 2-2 timer. 3 timer.
(5) Levetiden for lyskilden i fluorescensmikroskopet er begrænset, og prøverne bør inspiceres kollektivt for at spare tid og beskytte lyskilden. Når vejret er varmt, skal der tilføjes blæsere for at sprede varmen, og de nye pærer skal registreres fra begyndelsen af deres brugstid. Når du vil bruge den igen, efter at lampen er slukket, skal du vente, indtil pæren er tilstrækkeligt afkølet, før du tænder den. Undgå at tænde lyskilden flere gange om dagen.
(6) Observer prøven umiddelbart efter farvning, da fluorescensen gradvist vil svækkes over tid. Hvis prøven opbevares i en polyethylenplastikpose ved 4 grader, kan fluorescenssvækkelsestiden forsinkes, og monteringsmidlet kan forhindres i at fordampe.
(7) Bedømmelsesstandard for fluorescenslysstyrke: den er generelt opdelt i fire niveauer, det vil sige "et" - ingen eller svag fluorescens kan ses. " plus "—Kun tydeligt synlig fluorescens kan ses. " plus plus "—Synlig og lys
