Forskellen mellem almindelig optisk mikroskopi og fluorescensmikroskopi
Optisk mikroskop: Det er et optisk instrument, der bruger optiske principper til at forstørre og afbilde små objekter, der ikke kan skelnes af det menneskelige øje, for at udtrække mikrostrukturel information til mennesker.
Fluorescerende mikroskop: Fluorescerende mikroskop bruger ultraviolet lys som lyskilde til at belyse objektet, der testes, hvilket får det til at udsende fluorescens og derefter observere formen og positionen af objektet under mikroskopet. Fluorescensmikroskopi bruges til at studere absorption, transport, distribution og lokalisering af intracellulære stoffer. Nogle stoffer i celler, såsom klorofyl, kan udsende fluorescens efter at være blevet udsat for ultraviolet stråling; Selvom nogle stoffer ikke selv kan udsende fluorescens, kan de også udsende fluorescens efter at være blevet farvet med fluorescerende farvestoffer eller fluorescerende antistoffer og bestrålet med ultraviolet lys. Fluorescensmikroskopi er et af værktøjerne til kvalitativ og kvantitativ forskning i disse stoffer.
Et optisk mikroskop består generelt af en scene, et spotlight-belysningssystem, et objektiv, et okular og en fokuseringsmekanisme. Spotlight-belysningssystemet kan opnå forskellige observationsmetoder, såsom mørke punkter på en lys baggrund (kendt som lys feltbelysning) eller lyse punkter på en mørk baggrund (kendt som mørk feltbelysning) ved at ændre belysningsmetoden for bedre at opdage og observere fine strukturer i forskellige situationer.
Fluorescerende mikroskopi og almindelig mikroskopi har følgende forskelle:
1. Belysningsmetoden er normalt en dråbetype, hvor lyskilden projiceres på prøven gennem objektivlinsen;
2. Lyskilden er ultraviolet lys, med en kortere bølgelængde og højere opløsning end almindelige mikroskoper;
3. Der er to specielle filtre, det ene foran lyskilden bruges til at bortfiltrere synligt lys, og det mellem okularet og objektivlinsen bruges til at filtrere ultraviolet lys fra for at beskytte det menneskelige øje.
Fluorescensmikroskopi er også en type optisk mikroskop, hvor hovedforskellen er de forskellige excitationsbølgelængder mellem de to. Dette bestemmer forskellene i struktur og anvendelse mellem fluorescerende mikroskoper og almindelige optiske mikroskoper.
Fluorescensmikroskopi er et grundlæggende værktøj til immunfluorescenscytokemi. Det er sammensat af hovedkomponenter såsom lyskilde, filterpladesystem og optisk system. Det er brugen af en vis bølgelængde af lys til at excitere prøven og udsende fluorescens, som forstørres gennem et objektiv og okularsystem for at observere fluorescensbilledet af prøven.
