Forskellen mellem to-foton mikroskopi og laser konfokal mikroskopi
Laserkonfokalmikroskop er et sæt observations-, analyse- og outputsystemer, der bruger laser som lyskilde, konjugeret fokuseringsprincip og enhed på basis af traditionelt optisk mikroskop og digital billedbehandling af det observerede objekt ved hjælp af en computer. Hovedsystemerne omfatter laserlyskilder, automatiske mikroskoper, scanningsmoduler (herunder konfokale optiske vejkanaler og nålehuller, scanningsspejle, detektorer), digitale signalprocessorer, computere og billedoutputenheder (skærme, farveprintere). Ved at bruge et laserscanningskonfokalmikroskop er det muligt at udføre tomografi og billeddannelse af den observerede prøve. Derfor er det muligt at observere og analysere den tredimensionelle rumlige struktur af celler uden skade.
Samtidig er laserscanning konfokalmikroskopi også et kraftfuldt værktøj til dynamisk observation af levende celler, multipel immunofluorescensmærkning og ionfluorescensmærkning. Den analyserer nøjagtigt essensen af spektret og skelner signaler fra forskellige mærker med stærkt overlappende emissionsspektre.
Det vigtigste er, at for flerfarvet fluorescensfarvning kan det fuldstændigt eliminere indflydelsen af fluorescenskrydsning, samtidig med at tabet af prøvefluorescenssignal minimeres. Det er alt sammen ting, som almindelige spejle ikke kan opnå.
Brændviddeforholdet mellem mikroskopobjektiv og okular
Forskellige principper
1. Fluorescensmikroskop: Det bruger ultraviolet lys som lyskilde til at belyse objektet, der testes, hvilket får det til at udsende fluorescens og derefter observere objektets form og position under mikroskopet.
2. Laserkonfokalmikroskop: På basis af fluorescensmikroskopi-billeddannelse installeres en laserscanningsenhed til at excitere fluorescensprober ved hjælp af ultraviolet eller synligt lys.
Forskellige egenskaber
1. Fluorescensmikroskop: bruges til at studere absorption, transport, distribution og lokalisering af stoffer i celler. Nogle stoffer i celler, såsom klorofyl, kan udsende fluorescens efter at være blevet udsat for ultraviolet stråling; Nogle stoffer udsender muligvis ikke selv fluorescens, men hvis de farves med fluorescerende farvestoffer eller fluorescerende antistoffer, kan de også udsende fluorescens under ultraviolet stråling.
2. Laserkonfokalmikroskop: Brug af en computer til billedbehandling for at opnå fluorescerende billeder af den indre mikrostruktur af celler eller væv og til at observere fysiologiske signaler såsom Ca2+, pH-værdi, membranpotentiale og ændringer i cellemorfologi på subcellulært niveau.
