Grundlæggende og strukturelle elementer i et fluorescensmikroskop
Fluorescensmikroskopi bruger et punkt med høj lyseffektivitet til at udsende lys af en bestemt bølgelængde (såsom ultraviolet lys 3650 tommer eller lilla blåt lys 4200 tommer) gennem filtersystemet som excitationslyset til at excitere de fluorescerende stoffer i prøven for at udsende fluorescens af forskellige farver Derefter observerer du gennem forstørrelsen af objektivlinsen og okularet. På denne måde, under en stærk kontrast baggrund, selv om fluorescensen er meget svag, er den let at identificere og har høj følsomhed. Det bruges hovedsageligt til forskning i cellestruktur og funktion og kemisk sammensætning. Den grundlæggende struktur af et fluorescensmikroskop er sammensat af et almindeligt optisk mikroskop plus noget tilbehør (såsom en fluorescerende lyskilde, et excitationsfilter, en tofarvet stråledeler og et blokeringsfilter osv.). Fluorescerende lyskilde – brug generelt ultrahøjtryks-kviksølvlampe (50-200W), som kan udsende lys med forskellige bølgelængder, men hvert fluorescerende stof har en excitationsbølgelængde, der producerer den stærkeste fluorescens, så et excitationsfilter (Generelt, der er ultraviolette, lilla, blå og grønne excitationsfiltre), som kun tillader excitationslys af en vis bølgelængde at passere igennem og bestråle prøven, mens de absorberer andet lys. Efter at hvert stof er bestrålet med excitationslys, udsender det synlig fluorescens med en længere bølgelængde end bestrålingsbølgelængden på meget kort tid. Fluorescens er specifik og generelt svagere end excitationslys. For at observere specifik fluorescens skal blokering (eller undertrykkelse) tilføjes bag objektivlinsen og bruges sammen med den.
Forskellen mellem fluorescensmikroskop og almindeligt mikroskop
1. Belysningsmetoden er sædvanligvis episkopisk, det vil sige, at lyskilden projiceres på prøven gennem objektivlinsen;
2. Lyskilden er ultraviolet lys, bølgelængden er kortere, og opløsningen er højere end almindelige mikroskopers;
3. Der er to specielle filtre, det ene foran lyskilden bruges til at bortfiltrere synligt lys, og det mellem okularet og objektivlinsen bruges til at filtrere ultraviolette stråler fra for at beskytte det menneskelige øje.
Fluorescensmikroskop er også en slags optisk mikroskop, den største forskel er, at excitationsbølgelængden af de to er forskellig. Dette bestemmer forskellen mellem fluorescensmikroskopet og det almindelige optiske mikroskop med hensyn til struktur og anvendelse.
Fluorescensmikroskopi er et vigtigt værktøj i immunfluorescerende cytokemi. Det er sammensat af hovedkomponenter såsom lyskilde, filterpladesystem og optisk system. Det er at bruge en vis bølgelængde af lys til at excitere prøven til at udsende fluorescens, og at observere fluorescensbilledet af prøven ved at forstærke objektivlinsen og okularsystemet.
