Strukturen og hovedkomponenterne i et fluorescensmikroskop
(1) Lyskilde
I dag er en 200W ultrahøjtryks kviksølvlampe almindeligvis brugt som lyskilde. Den er lavet af kvartsglas, med en sfærisk form i midten og en vis mængde kviksølv fyldt indeni. Under drift får udladningen mellem de to elektroder kviksølvet til at fordampe, og trykket inde i kuglen stiger hurtigt. Når kviksølvet fordamper fuldstændigt, kan det nå 50-70 standard atmosfærisk tryk, hvilket generelt tager omkring 5-15 minutter. Luminescensen af kviksølvlamper med ultrahøjt tryk er resultatet af udladningen mellem elektroderne, som kontinuerligt dissocierer og reducerer kviksølvmolekyler og udsender fotoner. Det udsender stærkt ultraviolet og blåt violet lys, hvilket er tilstrækkeligt til at excitere forskellige fluorescerende stoffer, derfor er det meget brugt i fluorescensmikroskoper.
Ultrahøjtryks kviksølvlamper udsender også en stor mængde varmeenergi. Derfor skal lamperummet have gode varmeafledningsforhold, og arbejdsmiljøtemperaturen bør ikke være for høj.
Den nye ultrahøjtryks-kviksølvlampe kræver ikke højspænding for at tænde i det tidlige brugsstadium. Efter nogen tids brug skal den startes med højspænding (ca. 15000V). Efter start holdes arbejdsspændingen generelt på 50-60V, og arbejdsstrømmen er omkring 4A. Den gennemsnitlige levetid for en 200W ultrahøjtrykskviksølvlampe er omkring 200 timer, når den bruges i 2 timer hver gang. Jo kortere driftstid, jo kortere levetid. Hvis den kun betjenes i 20 minutter én gang, reduceres levetiden med 50 %. Forsøg derfor at minimere antallet af starter ved brug. Lyseffektiviteten af en pære falder gradvist under brug. Når lyset er slukket, skal det vente på afkøling, før det genstartes. Efter at have tændt pæren, bør den ikke slukkes med det samme for at undgå ufuldstændig fordampning af kviksølv og beskadigelse af elektroden. Generelt skal den vente i 15 minutter. På grund af det høje tryk og den stærke ultraviolette stråling fra ultrahøjtrykskviksølvlampen skal pæren placeres i lampekammeret, før den tændes, for at undgå øjenskade og eksplosion under drift.
Kredsløbet af en ultrahøjtryks kviksølvlampe (100W eller 200W) lyskilde og dens komponenter, herunder spændingstransformation, strømundertrykkelse og opstart. Der er et system til justering af lyscentret af pæren i lamperummet, med en aluminiumbelagt konkav reflektor monteret bag pæren og en lyssamlende linse installeret foran.
Den indenlandsk producerede ultrahøjtryks-kviksølvlampe GCQ-200 har god ydeevne og kan erstatte importerede pærer såsom HBO-200 med en gennemsnitlig levetid på over 200 timer og en relativt lav pris.
En enkel og bærbar højfarvetemperatur brom wolfram fluorescerende lyskildeenhed udviklet i Kina, med lille volumen, let vægt, lav effekt, dobbelt brug af AC og DC (med indbygget DC strømforsyning), nem at bære, praktisk at bruge , er blevet forfremmet og anvendt.
(2) Farvefiltreringssystem
Farvefiltersystemet er en vigtig del af et fluorescensmikroskop, der består af en excitationsfilterplade og en kompressionsfilterplade. Modellen af filterpladen er ofte inkonsekvent blandt producenter. Filterplader er generelt opkaldt efter den grundlæggende farvetone, hvor det første bogstav repræsenterer farvetonen, det andet bogstav repræsenterer glasset, og tallet repræsenterer modellens egenskaber. Olympus mikroskop
(3) Objektiv linse
Forskellige objektivlinser kan anvendes, men brug af akromatiske objektivlinser er velegnet til fluorescens på grund af deres ekstremt lave selvfluorescens og transmittansydelse (bølgelængdeområde). På grund af det faktum, at fluorescenslysstyrken af billedet i mikroskopets synsfelt er direkte proportional med kvadratet af objektivlinsens blændeforhold og omvendt proportional med dets forstørrelse, for at forbedre lysstyrken af fluorescensbilledet, er en objektivlinse med et større blændeforhold bør anvendes. Især ved høj forstørrelse er dens påvirkning meget betydelig. For prøver med utilstrækkelig fluorescens bør der derfor anvendes et objektiv med en høj blændehastighed kombineret med et okular så lavt som muligt (4 x, 5 x, 6,3 x osv.).
(4) Reflekterende spejl
Det reflekterende lag af en reflektor er generelt belagt med aluminium, fordi aluminium absorberer mindre ultraviolet og synligt lys i det blå lilla område med en refleksion på over 90 %, mens sølv kun reflekterer 70 %; Generelt anvendes flade reflektorer.
(5) Spotlight spejl
Koncentratoren designet og lavet specielt til fluorescensmikroskopi er lavet af kvartsglas eller andet glas, der transmitterer ultraviolet lys. Der er to typer mørkefeltspottere med et særskilt synsfelt. Der er også en differentiel fluorescenskoncentrator.
(6) Faldlysanordning
Den nye type faldende lysenhed reflekterer de kortere bølgelængdedele (ultraviolet og lilla blå) fra lyskilden til interferensspektrofotometerfilteret på grund af egenskaberne af belægningen på filteret. Når filteret vender mod lyskilden i en vinkel på 45 grader. Når den vippes, rettes den lodret mod objektivlinsen og rettet mod prøven gennem objektivlinsen, hvilket får prøven til at blive exciteret. På dette tidspunkt fungerer objektivlinsen direkte som en kondensator. Samtidig er filterets lange dele (grøn, gul, rød osv.) transparente for filteret, så de ikke reflekterer i retning af objektivet. Filteret fungerer som en excitationsfilterplade, og fordi fluorescensen af prøven er i det synlige lys lange bølgelængdeområde, kan det observeres gennem filteret og nå målet. Lysstyrken af fluorescensbilledet stiger med forstørrelsen og er stærkere end den transmitterede lyskilde ved høj forstørrelse. Ud over sin funktion som transmissiv lyskilde er den mere velegnet til direkte observation af uigennemsigtige og semi-transparente prøver, såsom tykke plader, filtermembraner, kolonier, vævskulturprøver osv. I de senere år har nyudviklede fluorescensmikroskoper ofte bruge faldende lysenheder, kendt som faldende lys fluorescensmikroskoper.
