Hvilken slags mikroskop bruges til at se formen af mikrobielle celler
En samlebetegnelse for alle bittesmå organismer, som er svære for individer at observere med det blotte øje. Mikroorganismer omfatter bakterier, vira, svampe og nogle få alger. (Nogle mikroorganismer er dog synlige for det blotte øje, såsom svampe tilhørende svampe, Ganoderma lucidum osv.) Virus er en type "ikke-cellulære organismer" sammensat af nogle få komponenter som nukleinsyrer og proteiner, men deres overlevelse må afhænge af levende celler. Alt efter de forskellige miljøer, der findes, kan de opdeles i prokaryote mikroorganismer, rummikroorganismer, svampemikroorganismer, gærmikroorganismer, marine mikroorganismer mv.
Mikroorganismers rolle og skade:
En af de vigtigste påvirkninger af mikroorganismer på mennesker er forekomsten af infektionssygdomme. 50 procent af menneskets sygdomme er forårsaget af vira. Historien om mikrober, der forårsager sygdomme hos mennesker, er historien om menneskers konstante kamp med dem. Mennesker har gjort store fremskridt i forebyggelse og behandling af sygdomme, men nye og tilbagevendende mikrobielle infektioner forekommer fortsat, såsom et stort antal virussygdomme, der mangler effektive terapeutiske lægemidler. Den patogene mekanisme for nogle sygdomme er ikke klar. Misbruget af et stort antal bredspektrede antibiotika har forårsaget et stærkt selektionspres, hvilket får mange stammer til at mutere, hvilket fører til fremkomsten af lægemiddelresistens, og menneskers sundhed er truet af nye trusler. Nogle segmenterede vira kan mutere gennem rekombination eller resortiment. Det mest typiske eksempel er influenzavirus.
Efter at have kendskab til den specifikke definition af mikroorganismer, hvilken type mikroskop skal forsøgslederen bruge, når han studerer mikroorganismer for at se, og hvilket mikroskop kan bruges til at se bedre og til at observere og analysere almindelige mikrobielle former.
Opfindelsen af mikroskopet er at kunne se smilende genstande, som ikke kan ses med det blotte øje. Mikroorganismernes størrelse er meget lille, så de skal forstørres og observeres ved hjælp af et mikroskop. Derudover findes der mange typer mikroorganismer, så stort set kan de fleste optiske mikroskoper For at observere mikroorganismer er næste spørgsmål, hvilken type mikroskop der skal bruges til observation og analyse af mikroorganismer. Almindelige mikroskoper til observation af mikrobiel morfologi omfatter biologiske mikroskoper, fasekontrastmikroskoper, inverterede mikroskoper, fluorescensmikroskoper og konfokale mikroskoper. Mikroskop og så videre.
Det følgende beskriver de forskellige mikroskoper, der bruges til at observere mikroorganismer:
1. Almindelig lysmikroskop
Naturligt lys eller lys bruges som lyskilde, og dets bølgelængde er omkring {{0}},4 μm. Mikroskopets opløsning er halvdelen af bølgelængden, det vil sige 0,2 μm, og det mindste billede, der er synligt med det blotte øje, er 0,2 mm. Brug af et oliespejl (nedsænkningsspejl) til at forstørre 1000 gange kan derfor forstørre partiklerne på 0,2 μm til 0,2 mm, som er synlige for det blotte øje. Almindelige optiske mikroskoper kan bruges til observation af bakterier, actinomycetes og svampe.
2. Mørkefeltsmikroskopi bruges almindeligvis til at observere ufarvet mikrobiel morfologi og bevægelse. Efter at mørkefeltskondensatoren er installeret i det almindelige mikroskop, kan lyset ikke trænge direkte ind fra midten, og synsfeltet er mørkt. Når prøven modtager skråt lys fra kanten af kondensatoren, kan den spredes, så lyse mikroorganismer kan observeres i den mørke feltbaggrund, såsom bakterier eller spirocheter.
3. Fasekontrastmikroskop Fasekontrastmikroskop bruger lyseffekten af faseforskelpladen til at ændre lysfasen og amplituden af direkte lys og konvertere lysfasens forskel til lysintensitetsforskel. Under et fasekontrastmikroskop, når lys passerer gennem en ufarvet prøve, er forskellen i lysfase forårsaget af inkonsistensen af tætheden af forskellige dele af prøven, og mikroorganismers morfologi, indre struktur og bevægelsesmåde kan observeres.
4. Fluorescensmikroskop Fluorescensmikroskop er grundlæggende det samme som almindeligt optisk mikroskop, den største forskel er lyskilden, filteret og kondensatoren. På nuværende tidspunkt bruger de fleste af dem epi-lys-enheder, og højtryks-kviksølvlamper bruges almindeligvis som lyskilder, som kan udsende ultraviolet eller blåviolet lys. Der er to slags filtre: excitationsfilter og absorptionsfilter. Ud over generelle lysfeltskondensatorer kan mørkefeltskondensatorer også bruges i fluorescensmikroskoper, der bruger blåt lys for at øge kontrasten mellem fluorescens og baggrund. Denne metode er anvendelig til påvisning eller identifikation af bakterier farvet med fluorescerende pigmenter eller kombineret med fluorescerende antistoffer.
5. Elektronmikroskoper bruger elektronstrøm som lyskilde. Sammenlignet med synligt lys er bølgelængden titusindvis af gange forskellig, hvilket i høj grad forbedrer opløsningen. Den magnetiske spole bruges som det optiske forstærkningssystem, og forstørrelsen kan nå titusindvis eller hundredtusindvis af gange. Det bruges ofte i viruspartikler. og observation af bakteriel ultrastruktur.
Observation af ufarvede mikrobielle prøver:
Ufarvede prøver kan generelt bruges til at observere bakteriel morfologi, kraft og bevægelse. Bakterier er farveløse og gennemsigtige, når de er ufarvede, og observeres under et mikroskop hovedsageligt af forskellen mellem bakteriernes brydningsindeks og det omgivende miljø. Bakterier med flageller bevæger sig kraftigt, mens bakterier uden flageller viser uregelmæssig Brownsk bevægelse. Levedygtige bakterier som Treponema pallidum, Leptospira og Campylobacter har karakteristiske former og bevægelsesmønstre, som er af diagnostisk betydning. De almindeligt anvendte metoder er trykfaldsmetode, vedhængende dropmetode og kapillærmetode.
1. Hængende dråbemetode Påfør vaseline rundt om det konkave hul på det rene konkave glasobjektglas, tag en ring af bakteriesuspension med en inokulationsløkke og sæt den i midten af dækglasset, og juster derefter det konkave hul på det konkave glasglas med dråben i midten af dækglasset og sæt dækslet på, vend det derefter hurtigt om, tryk let på dækglasset for at få det til at klæbe tæt til vaselinen på kanten af det konkave hul, og observer derefter under en høj effekt mikroskop (eller mørkt felt).
2. Tag en ring af bakteriesuspension med en inokulationsløkke og anbring den i midten af et rent objektglas ved trykfaldsmetoden, og dæk forsigtigt bakteriesuspensionen med et dækglas, og sørg for at undgå dannelse af luftbobler og forhindre bakteriesuspensionen fra at flyde over. Brightfield (eller darkfield) observation under en højtydende linse.
3. Kapillærmetoden bruges hovedsageligt til undersøgelse af kinetikken af anaerobe bakterier. Vælg normalt 60~70mm lang. Efter at have suget den anaerobe bakteriesuspension gennem et kapillar med en åbning på 0,5-1,0 mm, forsegles de to ender af kapillaren med en flamme. Kapillæren blev fikseret på glaspladen med plastikpapir og observeret under en højeffektlinse i mørkt felt.
Observation af farvede mikrobielle prøver med et mikroskop:
Efter at bakterieprøven er farvet, kan bakteriernes morfologiske karakteristika (såsom størrelse, form, arrangement osv.) på grund af den skarpe farvekontrast mellem bakterierne og det omgivende miljø og nogle specielle strukturer være tydeligt observeret under et almindeligt optisk mikroskop (såsom kapsler, flageller, sporer osv.), og bakterierne kan klassificeres og identificeres efter farvningsreaktiviteten.
(1) Generel procedure for bakteriel farvning Den generelle procedure for bakteriel farvning er: udstrygning (tørring) - fiksering - farvning.
1. Udstrygningsforberedelse af blod, sekreter, udskillelser, punkteringsvæske og flydende kultur, og direkte tyndfilmsudtværinger på objektglas; obduktion eller inficeret dyrevæv, smør læsionen med en vatpind til prøveudtagning. Til klargøring af bakteriekolonier eller græsplæner på fast medium skal du først bruge en inokulationsløkke til at tage en ring med normalt saltvand og placere den i midten af objektglasset, derefter bruge en steril inokuleringsløkke til at tage en lille mængde kultur og male den jævnt i normalt saltvand, og fordel det på 1cm2 Store eller små malede overflader, lad det tørre naturligt ved stuetemperatur eller tørre langsomt på afstand.
2. Formålet med fiksering er at dræbe bakterier, koagulere bakterielt protein og struktur og lette farvning; fremme bakterier til at klæbe til objektglasset for at undgå at blive vasket væk af vand under vask; ændre permeabiliteten af bakterier til farvestoffer, hvilket er gavnligt for strukturen af bakterieceller af farvning. Det fikseres normalt ved opvarmning med en flamme, og den tørrede smøre ledes hurtigt gennem flammen i 3 gange. Det er bedre ikke at brænde huden på bagsiden af hånden, når den rører ved diaset.
3. Farvning I henhold til forskellige inspektionsformål skal du vælge forskellige farvningsmetoder til farvning. Ved farvning tilsættes farveopløsningen dråbevis for at øge dækningen.
4. Bejdsemiddel Ethvert stof, der kan øge affiniteten mellem farvestoffet og det farvede objekt, fiksere farvestoffet på det farvede objekt og forårsage en ændring i cellemembranens permeabilitet kaldes et bejdsemiddel. Almindeligt brugt er alun, garvesyre, metalsalte og jod osv., og opvarmning bruges også til at fremme farvning. Bejdsemidler kan bruges mellem primær farvning og modfarvning, og kan også bruges efter fiksering eller indeholdt i fikseringsmiddel og farvning.
5. Affarvning Ethvert kemisk middel, der kan fjerne farven på den farvede genstand, kaldes en affarvningsmiddel. Ethanol, acetone osv. bruges almindeligvis som affarvningsmidler. Affarvningsmidlet kan påvise graden af stabilitet af kombinationen af bakterier og farvestoffer, som kan bruges til differentiel farvning.
6. Modfarvning Bakterier eller deres strukturer, der er blevet affarvede, modfarves ofte med en modfarvningsopløsning for nem observation. Farven på modfarvningsopløsningen er forskellig fra farven på den primære farveopløsning for at danne en skarp kontrast. Modfarvningen bør ikke være for kraftig, for ikke at dække over farven på den indledende farvning.
