Hvorfor er forstørrelsen af en olielinse større end for en almindelig objektivlinse?
Årsager til, at bakterier skal fikseres før farvning i mikrobiologiske eksperimenter:
1: Dræb celler og gør farvestoffet let at farve.
To: Få bakterierne til at klæbe til glasset og ikke let vaskes væk af vand.
Ved fiksering skal du tørre langsomt. Hvis du virkelig vil fremskynde processen, kan du tørre det et par gange på afstand over flammen fra en spritlampe. Tør ikke glasset, så det varmes op, ellers kan det ødelægge bakteriens livsform.
Gramfarvning og mikroskopisk observation af bakterier
Eksperimentelt princip
Princip for Gram-farvning: Bakteriers forskellige reaktioner på Gram-farvning skyldes den forskellige sammensætning og struktur af deres cellevægge. Gram-positive bakteriers cellevæg er hovedsageligt et netværk af peptidoglycaner. Ved behandling med ethanol bliver porestørrelsen af netværksstrukturen mindre på grund af dehydrering, og permeabiliteten falder, hvorved komplekset af krystalviolet jod dannes. Stoffet elueres ikke let og forbliver i cellerne. Efter affarvning og modfarvning bevares den blå-lilla farve af det primære farvestof stadig. Cellevæggens peptidoglycanlag af gramnegative bakterier er tyndt og har et højt lipidindhold. Derfor opløses lipiderne under affarvning af ethanol (eller acetone), og cellevæggens permeabilitet øges, hvilket gør krystalviolet-jodkomplekset Det er relativt nemt at blive elueret ud. Efter modfarvning med modfarvning farves cellerne med modfarvens røde farve. Princip for mikroskopbilleddannelse: Moderne almindelige optiske mikroskoper bruger to linsesystemer, okularer og objektivlinser, til at forstørre billeder, så de kaldes ofte sammensatte mikroskoper. I det optiske system i et mikroskop er ydeevnen af objektivlinsen den mest kritiske. Olielinsen har den største forstørrelse og er den vigtigste for mikrobiologisk forskning. Hovedformålet med at tilføje dråber linseolie mellem objektglasset og linsen er at øge belysningens lysstyrke og øge opløsningen af mikroskopet. Brug af olie i stedet for luft som lysudbredelsesmedium reducerer lysets brydning eller totalreflektion, hvilket gør det observerede billede klarere.
Se efter de bakteriekolonier, der skal observeres under et mikroskop med lav forstørrelse (bliv ved med at flytte objektglasset, hvis du mærker en rød skygge, stop straks, juster forstørrelsen, hvis det ikke er en koloni, fortsæt med at kigge), løft linsecylinderen , og skift derefter til olielinsen. Tilføj en dråbe cederolie til prøveområdet, og brug den grove justeringsanordning til forsigtigt at sænke linsebeholderen, så olielinsen er nedsænket i linseolien og næsten i kontakt med prøven. Hæv kondensatoren til den højeste position, og åbn åbningen. Brug grovjusteringen til langsomt at hæve linsecylinderen, indtil objektbilledet vises i synsfeltet, og brug finjusteringen til at gøre det klart og i fokus.
