Arbejdsprincippet for laserkonfokalmikroskop
Arbejdsprincippet for laserkonfokalmikroskop
Olympus laserkonfokalmikroskop er en detektor, der kan optage signaler. Dens arbejdsprincip er, at en punktlyskilde vil blive afbildet som en forstørret plet kaldet "Airy disk" efter at have passeret gennem et fluorescensmikroskop. I et standard interferometrisk konfokalmikroskop med hvidt lys blokeres lys, der udsendes uden for brændplanet, af et nålehul, hvis størrelse bestemmer, hvor meget af Airy-skiven der kan trænge ind i detektoren. Jo mindre nålehullet er, desto skarpere bliver det resulterende billede, og jo svagere bliver billedet, fordi det meste af lyset går tabt. Jo mindre blændenåle, jo bedre opløsning, men – igen – jo mere lys går der tabt. Olympus laserkonfokalmikroskop kan give et farve CCD-billede og et konfokalt laserscanningsbillede på samme tid. Olympus konfokale lasermikroskoper er i stand til højdemåling gennem en konfokal opsætning af én lyskilde, én prøve og én detektor. Når prøven er placeret ved objektivlinsens brændplan, og laserlyset, der reflekteres fra prøveoverfladen, fokuseres ind i den konfokale blænde, vil fotodetektoren modtage signalet fra prøven. Når prøven er i ude af fokus-position, modtager den konfokale blænde ikke lasersignalet, så kun det in-fokuserede signal opsamles. Denne funktion kan realisere den optiske snitfunktion af Olympus laserkonfokalmikroskop.
Fordele ved konfokal lasermikroskopi
1. Ved at bruge laserlys som lyskilde, efter at de tilsvarende fluorescerende prober er markeret, scannes prøven punkt for punkt for at opnå todimensionelle optiske tværsnitsbilleder lag for lag. Det har funktionen "celle-CT" og kan understøttes af computer-tredimensionel rekonstruktionssoftware til at opnå tredimensionelle billeder, som kan roteres i enhver vinkel for at observere den tredimensionelle form og rumlige forhold mellem celler og væv;
2. Det kan observere levende celler og væv uden skader og dynamisk måle den fysiologiske information om levende celler såsom Ca-ionkoncentration og pH-værdi i celler;
3. Den kan måle cellemembranens fluiditet, intercellulær kommunikation, cellefusion, cytoskelettets elasticitet osv., og kan bruges som en "let kniv" til at fuldføre intracellulær "kirurgi". Denne teknologi muliggør in situ dynamisk og kvantitativ observation og måling af levende celler og væv.
