Fluorescensmikroskopers principper og strukturelle karakteristika
Fluorescensmikroskop bruger en højeffektiv punktlyskilde til at udsende en vis bølgelængde af lys (såsom ultraviolet lys 3650 eller lilla blåt lys 4200) gennem et farvefiltersystem som excitationslys, der exciterer fluorescerende stoffer i prøven til at udsende forskellige farver af fluorescens gennem objektivet og derefter observerer objektivet. På denne måde, selv med svag fluorescens i en stærk baggrund, er den let at genkende og har høj følsomhed. Det bruges hovedsageligt til undersøgelse af cellestruktur, funktion og kemisk sammensætning. Den grundlæggende struktur af et fluorescensmikroskop er sammensat af et almindeligt optisk mikroskop og noget tilbehør såsom en fluorescerende lyskilde, excitationsfilter, dobbeltfarvet stråledeler og blokeringsfilter. Fluorescerende lyskilde - bruger normalt ultra-højtrykskviksølvlamper (50-200W), som kan udsende lys med forskellige bølgelængder, men hvert fluorescerende stof har en excitationslysbølgelængde, der producerer den stærkeste fluorescens. Derfor skal excitationsfiltre (normalt ultraviolette, lilla, blå og grønne excitationsfiltre) tilføjes for kun at tillade en vis bølgelængde af excitationslys at passere igennem og bestråle prøven, mens alt andet lys absorberes. Efter at være blevet bestrålet med excitationslys udsender hvert stof synlig fluorescens med en bølgelængde, der er længere end bestrålingsbølgelængden, på meget kort tid. Fluorescens har specificitet og er generelt svagere end excitationslys. For at observere specifik fluorescens skal der tilføjes et blokerende (eller undertrykkende) filter bag objektivlinsen.
Dens funktioner er todelt: for det første at absorbere og blokere excitationslys i at trænge ind i okularet for at undgå forstyrrende fluorescens og beskadigelse af øjnene; for det andet at vælge og tillade specifik fluorescens at passere igennem, hvilket udviser en specifik fluorescerende farve. Der skal bruges to typer filtre i kombination.
