Justering af billeddannende optisk vejsystem af lysmikroskop og omrids af mikroskopisk undersøgelse
Justering af billeddannelsesoptisk vejsystem og mikroskopisk undersøgelsesoversigt
Justering af det billeddannende optiske system i et mikroskop udføres i overensstemmelse med behovene for forskellige mikroskopiteknikker. Den såkaldte mikroskopi, i en nøddeskal, er den belysningsmetode, der bruges, når man observerer en prøve gennem et mikroskop, og teknikken og metoden til at opnå bedre kontrast i billedet dannet af prøven. Det følgende beskriver kort, at mikroskopi er modnet i flere metoder og den tilsvarende metode til justering af mikroskop-billeddannelse optiske system.
1. Transmissionslysfelt:
Dette er den mest traditionelle og almindelige påføringsmetode siden opfindelsen af mikroskop. Grundlæggende komponenter: a. Objektivlinse: enhver objektivlinse kan bruges til lysfeltobservation; b. Spotting scope: alle slags spotting scopes kan bruges, helst udstyret med en blænde membran. Justeringsmetode: Efter at ovenstående mikroskops Kuhler belysningssystem er justeret, kan lysfeltmetoden anvendes. Anvendelsesområde: alle farvede vævssnit, blodudstrygninger osv. Forholdsregler: a. Ved brug af lysfelt-observationsmetoden skal Kuhler-belysningssystemet justeres; b. Synsfeltets membran bør ikke åbnes vilkårligt, og kondensatorspejlets frontlinse skal placeres faktuelt ud og ind i den optiske vej, når der bruges objektivlinser på 10×, mindre end 10× og mere end 10 ×; c. Kondensatorspejlets blændediafragma bør ikke bruges til at justere lysstyrken af synsfeltet, og højden af kondensatorspejlet bør ikke justeres vilkårligt, ellers vil mikroskopets opløsning blive sænket og opløsningen af det farvede væv vil blive beskadiget. mikroskopets opløsning og skaden er blevet justeret til Kuhlers belysningssystem; d. for mikrofotografier, hver ændring i brugen af en forstørrelse af objektivlinsen, skal du justere blændeblænden på kondensatorlinsen, så dens størrelse er nøjagtigt lig med den numeriske blænde, der bruges i objektivlinsen på 2/3.
2. Transmitteret lysfasekontrastmetode:
Dette er en moderne mikroskopundersøgelse af en kontrastforstærkningsmetode. Grundlæggende komponenter: fasekontrast objektivlinse, lyst synsfelt og fasekontrast multi-purpose spotting scope, fokusering teleskop, grønne filtre.
Justeringsmetoder:
en. Baseret på justeringen af Kuhler-belysningssystemet skal du fokusere prøven klart ved hjælp af lysfeltmetoden
b. Drej spotting-skopet til Ph1 for at justere skalaens position, vælg 10 × fasekontrastobjektiv, og udskift den gennemsigtige prøve, der skal observeres.
c. Tag et af okularerne ud, udskift det med et centreret teleskop, og fokuser på de to fasekontrastringe i synsfeltet (den sorte fasekontrastring på objektivlinsen og lystransmissionsfasekontrastringen på kondensatorlinsen).
d. De to fasekontrastringe i synsfeltet falder ikke nødvendigvis sammen, juster de to justeringsenheder på spotting-skopet (justering af venstre og højre position af fasekontrastringens justeringshåndtag og juster de forreste og bagerste positioner af friktionsknappen) , så lystransmissionsringen for og bag til højre og venstre falder sammen med den sorte ring
e. Efter justering, skift tilbage til okularet for observation og tryk det grønne filter ind i den optiske bane for at observere fasekontrastbilledet af prøven.
f. Når der er 20× og 40× objektiver til observation, skal spotting-linsen indstilles på Ph2-positionen, og ved brug af 100 objektiver skal spotting-linsen indstilles på Ph3-positionen.
Anvendelsesområde: Det er velegnet til at observere gennemsigtige, ufarvede eller ufarvede prøver, såsom alle slags celler, levende væv, ufarvede eller ufarvede vævssektioner, akvatiske organismer og så videre.
3. Metode for differentiel interferensfasekontrast:
For at overvinde fasekontrastmetoden til observation af prøvedetaljerne omkring billedet ledsaget af en glorie, vil maskere de detaljer, der skulle have været set, såvel som prøver eller vævssnit kræver en ret tynd tykkelse, i princippet kan være tykkere end 10?m og andre begrænsninger, brugen af princippet om dobbeltstråleinterferens til at designe den subdifferentielle interferensfasekontrastmetode.
Justeringsmetoder:
en. DIC-metoden skal justeres på baggrund af, at Kulemin-systemet allerede er blevet justeret
b. Brug et 10× objektiv til at bestemme fokuspositionen for objektivlinsen, der kan se prøven klart med et lyst synsfelt.
c. Placer polarisatoren i belysningsstien, og bemærk, at den skal være orienteret i øst-vestlig retning.
d. Drej kondensatorskiven til den position, der svarer til brugen af 10 × objektivlinsen, dvs. DIC 0.3-0.4.
e. Indsæt DIC-skyderen til 10× objektivlinsen på bagsiden af objektivlinsen eller på objektivkonverteren.
f. Indsæt analysatoren i den billeddannende optiske sti, og bemærk, at dens orientering skal være syd-nord.
g. Udskift den gennemsigtige prøve, der skal observeres, tænd for lyskilden for at fokusere prøven klart.
h. Juster DIC-indsatsen, så den differentielle interferenskontrastbillede for at opnå den bedste effekt, det vil sige den mest tydelige reliefeffekt.
jeg. Juster samtidig blændeblænden på kondensatorspejlet, så effekten af kontrasten også er optimal.
j. Finjuster derefter detaljerne i prøven for at se prøvens struktur på forskellige niveauer.
k. Hvis komplementærfarven (første ordens røde retardationsplade) indsættes og DIC-indsatsen justeres samtidigt, kan de stadigt skiftende strålende farver ses i synsfeltet med rød, orange, gul, grøn, blå, lilla, pink, pink-violet og gylden-gul. Anvendelsesområde: gennemsigtige eller ufarvede vævssnit, tykkelse op til ca. 100?m, levende væv og levende celler i kultur, små levende organismer og så videre.
