Anvendelse og anvendelse af fluorescensmikroskopprincipper
Principper og strukturelle karakteristika for fluorescensmikroskoper: Fluorescensmikroskoper bruger en punktlyskilde med høj lyseffektivitet til at udsende lys med en bestemt bølgelængde (såsom ultraviolet lys 3650 tommer eller lilla-blåt lys 4200 tommer) gennem et farvefiltersystem som excitationslys til excitere fluorescens i prøven. Efter at stoffet udsender fluorescens af forskellige farver, observeres det derefter gennem forstørrelsen af objektivlinsen og okularet. På denne måde, under en stærk kontrast baggrund, selvom fluorescensen er meget svag, er den let at identificere og har høj følsomhed. Det bruges hovedsageligt til undersøgelse af cellestruktur og funktion samt kemisk sammensætning. Den grundlæggende struktur af et fluorescensmikroskop er sammensat af et almindeligt optisk mikroskop plus noget tilbehør (såsom fluorescenslyskilde, excitationsfilter, tofarvet stråledeler, blokeringsfilter osv.). Fluorescerende lyskilde - bruger generelt en ultrahøjtryks kviksølvlampe (50 til 200W), som kan udsende lys af forskellige bølgelængder, men hvert fluorescerende stof har en excitationsbølgelængde, der producerer den stærkeste fluorescens, så et excitationsfilter ( Der er generelt ultraviolette, lilla, blå og grønne excitationsfiltre), som kun tillader excitationslyset af en bestemt bølgelængde at passere igennem og oplyse prøven, mens den absorberer alt andet lys. Efter at hvert stof er bestrålet med excitationslys, udsender det synlig fluorescens med en længere bølgelængde end bestrålingsbølgelængden på meget kort tid. Fluorescens er specifik og er generelt svagere end excitationslyset. For at observere specifik fluorescens kræves der et blokerende (eller undertrykkende) filter bag objektivlinsen. Den har to funktioner: Den ene er at absorbere og blokere excitationslyset i at trænge ind i okularet for at undgå at forstyrre fluorescensen og beskadige øjnene; den anden er at vælge og tillade specifik fluorescens at passere igennem for at vise en specifik fluorescensfarve. De to filtre skal vælges og bruges sammen.
