Anvendelser af laserscanning konfokalmikroskop i biologi
① Det er anvendeligt til næsten alle celleforskningsfelter, herunder cellebiologi, cellefysiologi, neurobiologi og neurofysiologi.
② Det muliggør ikke-invasiv realtidsobservation og analyse af levende celler til kombineret morfologisk og funktionel forskning. Celledetektering er ikke-invasiv, sikker, pålidelig og meget gentagelig. Data og billeder kan udskrives med det samme eller gemmes til langtidsbevaring.
③ Kontinuerlig optisk snitscanning kan udføres på levende celler, væv eller cellevævsskiver for at opnå fine 2D- og 3D-lagstrukturer af en enkelt celle, cellegrupper eller lokalt observeret væv. Disse omfatter cellespecifikke strukturer såsom cytoskeletter, kromosomer, organeller, cellemembransystemer og dybe strukturer af prøver, såvel som komplette tredimensionelle billeder. Firedimensionelle billeder kan erhverves ved at analysere ændringer over tid. Billeder, der varierer med fluorescensbølgelængde, kan også opnås for at realisere multidimensionel billeddannelse. Det muliggør rumlig lokalisering med høj præcision af vævsceller og andre målstrukturer og understøtter dynamisk observation, analyse og registrering i realtid til kvalitativ, kvantitativ, tidsopløst og positionsfordelingsanalyse.
④ Observation af cellulære biomaterialer i levende celler eller udskårne prøver mærket med fluorescerende prober, inklusive membranmærkning, cellesporing, målstoffer, biokemiske reaktioner, receptorer eller ligander, nukleinsyrer osv. Flere stoffer kan mærkes og observeres samtidigt på den samme prøve.
⑤ Fluorescerende mærkning af intracellulære ioner med enkelte eller flere mærker. Den registrerer forholdet og dynamiske ændringer af intracellulære ionkoncentrationer såsom pH, natrium, kalium, calcium og magnesium.
⑥ Måling af cellemembranpotentiale, påvisning af frie radikaler osv.
⑦ Udfør FRAP-eksperimenter med høj præcision (Fluorescence Recovery After Photobleaching). Kombineret med fluorescenstab i fotoblegningseksperimenter bruges det til at studere celle-celle-kommunikation og bevægelsen af intracellulære molekyler. I eksperimenter med tidsscanning og fotoblegning (fotodestruktion), kan data og billeder af hver kanal udlæses og konverteres synkront. FRET (Förster Resonance Energy Transfer) eksperimenter kan udføres for at studere bevægelse og interaktion mellem intracellulære molekyler og ioner via ændringer i fluorescensbølgelængde.
⑧ Den har høj præcision (rumlig lokalisering, kvantificering, bølgelængdeopløsning, tidsopløsning), høj følsomhed og hurtig respons. Den kan adskille, observere og analysere multifluorescensmærkede cellevæv i samme tidsvindue, selv for flere fluoroforer med meget tætte emissionsbølgelængder (kun adskillige nanometers forskel). Det giver også online måling og analyse funktioner såsom co-lokalisering analyse for multi-fluorescens etiketter.
