Sammenligning mellem konfokal mikroskopi og konventionel optisk mikroskopi
Mikroskop er det vigtigste værktøj til at observere celler. Ifølge forskellige lyskilder kan det opdeles i to kategorier: optiske mikroskoper og elektronmikroskoper. Førstnævnte bruger synligt lys (ultraviolet mikroskop bruger ultraviolet lys) som lyskilde, mens sidstnævnte bruger elektronstråle som lyskilde. Både almindelige optiske mikroskoper og laserkonfokale mikroskoper hører til optiske mikroskoper.
Almindelig optisk mikroskop
Et almindeligt biologisk mikroskop består af tre dele, nemlig: ① belysningssystem, inklusive lyskilde og kondensator; ② Det optiske forstærkningssystem, der består af et objektiv og et okular, er hoveddelen af et mikroskop. For at eliminere sfærisk og kromatisk aberration er både okularet og objektivet sammensat af komplekse linsegrupper Mekanisk anordning, der bruges til at fikse materialer og lette observation.
Klarheden af et mikroskops billede afhænger ikke kun af dets forstørrelse, men også af dets opløsning. Opløsning refererer til evnen af et mikroskop (eller et menneskeligt øje i en afstand af 25 cm fra målet) til at skelne objekter med små intervaller. Opløsningens størrelse afhænger af lysets bølgelængde, blændeindekset og mediets brydningsindeks. Det udtrykkes som: R=0.61 λ/NANA=nsin /2, hvor n=mediets brydningsindeks; =blændevinkel (den vinkel, hvorved prøven åbner objektivets blænde), NA=numerisk blænde. Er spejlets hjørne altid mindre end 180?, så den maksimale værdi af zui for sina/2 skal være mindre end 1.
Brydningsindekset for glas, der bruges til fremstilling af optiske linser, er 1.65-1.78, og jo tættere brydningsindekset for det anvendte medium er på glas, jo bedre. For tørre objektiver er mediet luft, og blændeforholdet er generelt 0.05-0.95; Olielinsen bruger cederolie som medium, og blændeforholdet kan være tæt på 1,5.
Bølgelængden af almindeligt lys er {{0}}nm, så opløsningsværdien af mikroskopet vil ikke være mindre end 0,2 μm, og opløsningen af det menneskelige øje er 0,2 mm. Derfor er den maksimale forstørrelse for mikroskopdesign normalt 1000X.
