Fluorescensmikroskoper kan opdeles i to typer i henhold til det optiske sti -princip:
1. transmission fluorescensmikroskop
Ældre fluorescensmikroskoper bruger et rampelys til at begejstre fluorescens ved at passere excitationslyskilden gennem prøvematerialet. Dets fordel er stærk fluorescens ved lav forstørrelse, men dens ulempe er, at dens fluorescens falder med stigende forstørrelse. Så det er kun egnet til at observere større eksemplarematerialer.
2. Faldende lysfluorescensmikroskop
Excitationslyset falder ned fra den objektive linse på overfladen af prøven ved hjælp af den samme objektive linse som belysningskondensatoren og den objektive linse til opsamling af fluorescens.
En dobbelt farvebjælker (Dichroic Mirror) skal føjes til den optiske sti, der danner en 45 graders vinkel med den optiske akse. Excitationslyset reflekteres i den objektive linse og fokuserer på prøven. Fluorescensen genereret af prøven såvel som excitationslyset reflekteret fra overfladen af den objektive linse og dækglas, indtast den objektive linse på samme tid og vender tilbage til den dobbelte farvebjælker for at adskille excitationslys og fluorescens. Den resterende excitationslys blokeres derefter af filterabsorptionen. Hvis forskellige kombinationer af excitationsfiltre, dobbeltfarvebjælkeparatorer og blokering af filtre bruges, kan de imødekomme behovene for forskellige fluorescerende reaktionsprodukter.
Fordelene ved dette fluorescensmikroskop er ensartet feltbelysning, klar billeddannelse og stærkere fluorescens med større forstørrelse.
3. fasekontrastmikroskop
Fasekontrastmikroskop er et mikroskop, der kan konvertere faseforskellen (eller optisk sti -forskel) genereret, når lys passerer gennem et objekt til amplitude (lysintensitet) ændringer. Hovedsageligt anvendt til at observere levende celler, ustainede vævsektioner eller farvede prøver, der mangler kontrast.
Det menneskelige øje kan kun skelne ændringer i bølgelængden (farve) og amplitude af synligt lys, men kan ikke skelne ændringer i fase. De fleste biologiske prøver er meget gennemsigtige, og amplituden af lysbølger forbliver dybest set uændrede efter at have passeret, med kun faseændringer.
Fasekontrastmikroskopet konverterer dybest set den optiske sti -forskel i synligt lys, der passerer gennem prøven til amplitudeforskellen, hvilket forbedrer kontrasten mellem forskellige strukturer og gør dem klare og synlige. Efter at have passeret gennem prøven gennemgår lyset brydning, afviger fra den originale optiske sti og bliver forsinket med 1/4 λ (bølgelængde). Hvis den optiske sti -forskel øges eller reduceres med yderligere 1/4 λ, bliver den optiske sti -forskel 1/2 λ, og interferensen mellem de to lysstråler øges eller falder, efter at aksen er kombineret, hvilket forbedrer kontrasten.
