Fluorescensmikroskoper kan opdeles i to typer efter princippet om lysvej:
1. Transmissionsfluorescensmikroskop
I ældre fluorescensmikroskoper passerer excitationslyskilden gennem prøvematerialet gennem en kondensator for at excitere fluorescens. Fordelen er, at fluorescensen er stærk ved lav forstørrelse, men ulempen er, at fluorescensen svækkes i takt med at forstørrelsen øges. Så det er kun egnet til at observere større prøvematerialer.
2.Epifluorescensmikroskopi
Excitationslyset falder nedad fra objektivlinsen på prøveoverfladen, dvs. den samme objektivlinse bruges som belysningskondensatoren og objektivlinsen til opsamling af fluorescens.
En dikroisk stråledeler (dichroisk spejl) skal tilføjes til den optiske vej, som er i en vinkel på 45o i forhold til den optiske akse. Excitationslyset reflekteres ind i objektivlinsen og koncentreres om prøven. Fluorescensen genereret af prøven reflekteres af overfladen af objektivlinsen og dækslet. Excitationslyset, der reflekteres på overfladen af glasglasset, går ind i objektivlinsen på samme tid og vender tilbage til den dikroiske stråledeler for at adskille excitationslyset og fluorescensen. Det resterende excitationslys absorberes derefter af blokeringsfilteret. Hvis du bruger forskellige kombinationsindsatser for excitationsfilter/dobbeltfarvet stråledeler/blokerende filter, kan du opfylde behovene for forskellige fluorescensreaktionsprodukter.
Fordelen ved denne form for fluorescensmikroskop er, at synsfeltet er ensartet belyst, billedet er klart, og jo større forstørrelse, jo stærkere fluorescens.
Hvad er hovedkategorierne af optiske mikroskoper?
1. Almindelig optisk mikroskop
Almindelige optiske mikroskoper er hovedsageligt sammensat af følgende dele: belysningssystemet, som involverer lyskilden og kondensatoren; det optiske forstørrelsessystem, som er sammensat af objektivlinsen og okularet. Det er den mest kritiske del af mikroskopet og er designet til at For at undgå overdreven sfærisk aberration og kromatisk aberration er både okularet og objektivlinsen sammensat af komplekse linsegrupper.
2. Laser konfokalt scanningsmikroskop
Det konfokale lasermikroskop lyder meget avanceret og kompliceret. Faktisk bruger den simpelthen laser som en scannende lyskilde til hurtigt at scanne og afbilde objekter punkt for punkt, linje for linje og overflade for overflade.
Baseret på laserstrålens kortere bølgelængde er selve strålen meget tynd, hvilket afgør, at det konfokale laserscanningsmikroskop har en høj opløsning, som er cirka tre gange så stor som et almindeligt optisk mikroskop. Denne type mikroskop bruges til at observere cellemorfologi og kvantitativt analysere intracellulære biokemiske komponenter og måle cellemorfologi.
3. Mørkefeltsmikroskop
Der er en lysplade i midten af kondensatoren på et mørkfeltsmikroskop, som forhindrer belysningslys i at trænge direkte ind i objektivlinsen. Kun det lys, der reflekteres og diffrakteres af prøven, kan trænge ind i objektivlinsen. Derfor er baggrunden for synsfeltet sort, og kanterne på objekterne er lyse.
