Multifoton laser scanning mikroskopi fordele og ulemper
Multi-Photon Laser Scanning Microscopy er en eksperimentel metode baseret på laserscanningsmikroskopiteknologi, der giver mere nøjagtige optiske sektionsmuligheder i 3D-visning. Multifoton fluorescens excitationsmetoden bruger lange bølgelængder af rødt eller nær-infrarødt lys til at opnå højopløselige fluorescerende billeder af prøver med minimal drab af aktive prøver, hvilket gør den velegnet til billeddannelse af levende celler, især tykt levende væv såsom hjerneskiver, embryoner, hele organer og endda hele organismer.
Fordelene er som følger:
1, brugen af rødt lys eller infrarødt lys excitation, lysspredning er lille (spredningen af små partikler og bølgelængden af den fjerde potens af det omvendte forhold).
2, kræver ikke et nålehul, kan opsamle flere spredte fotoner fra det billeddannende tværsnit.
3, kan nålehullet ikke skelne mellem de spredte fotoner, der udsendes af det ufokuserede område eller fokusområde, multi-foton i det dybe billeddannelsessignal-til-støj-forhold er godt.
4, enkelt-foton excitation af ultraviolet eller synligt lys, der anvendes i strålen for at nå brændplanet, før prøven let absorberes og dæmpes, ikke let til dyb excitation.
5, i den biologiske mikroskop observation, * den første overvejelse er ikke at beskadige den aktive tilstand af organismen selv, at opretholde vand, ion koncentration, ilt og næringsstof cirkulation. I lysobservations lejligheder skal både termisk energi og fotonenergi forblive i cellen uden at beskadige mængden af bestråling, lysenergi.
6, multi-foton mikroskop har også mange fordele. Såsom tredimensionel opløsning, dybdeindtrængning, i spredningseffektiviteten, baggrundslys, signal-til-støj-forhold, kontrol osv., er der tidligere lasermikroskoper, der ikke har eller har uforlignelige ud over egenskaberne.
Multi-foton konfokal laser scanning mikroskop er blevet udvidet til forskellige forsknings- og anvendelsesområder. Den er i stand til tredimensionel ikke-destruktiv observation af prøver i deres naturlige tilstand og kan forbedre opløsningen og signal-til-støj-forholdet i systemet. Ved at bruge ændringen af materialeegenskaber efter multi-foton excitation er det også muligt at opnå tredimensionel højdedatalagring og tredimensionel mikrofabrikation i enhver retning, som har en høj anvendelsesværdi. Det kan antages, at med den videre udvikling af maskiner, materialer, laserteknologi og andre teknologier relateret til multifoton konfokal mikroskopi, vil multifoton konfokal laser scanning mikroskop være større udvikling og bredere anvendelse.
Ulemperne er som følger:
1, kun fluorescensbilleddannelse.
2, hvis prøven indeholder kromoforer, der kan absorbere excitationslyset, såsom pigmenter, kan prøven blive termisk beskadiget.
3, er opløsningen lidt reduceret, selvom den kan forbedres ved samtidig brug af konfokal blænde, men der vil være signaltab.
4. Omkostningerne ved multifoton scanningsmikroskopi er høje på grund af begrænsningen af dyre ultrahurtige lasere.
