Darkfield-mikroskopets princip og funktion
① Et mørkfeltsmikroskop har et uigennemsigtigt stop i midten af kondensatoren. Det forhindrer direkte belysningslys i at trænge ind i objektivlinsen; kun lys reflekteret og diffrakteret af prøven opsamles. Som følge heraf virker baggrunden for synsfeltet mørk, mens kanterne af prøven er lyse. Dette mikroskop kan afsløre fine partikler så små som 4-200 nm, med opløsning op til 50 gange højere end for et almindeligt lysfeltsmikroskop.
② Princip Mørkefeltsmikroskopet er modificeret fra et konventionelt optisk mikroskop baseret på Tyndall-effekten. Den mørkefeltskondensator blokerer den centrale stråle fra lyskilden, så lyset ikke kan bevæge sig lige opad gennem prøven ind i objektivet. I stedet afledes lyset for at belyse prøven skråt. Prøven reflekterer eller spreder det indfaldende lys, og det spredte lys kommer ind i objektivet og skaber en mørk baggrund over hele synsfeltet.
③ Anvendelsesområde Mørkefeltsmikroskopi bruges almindeligvis til at observere ufarvede transparente prøver. Sådanne prøver har et brydningsindeks tæt på det omgivende mediums og er vanskelige at skelne under almindelig lysfeltbelysning. Dark-field belysning forbedrer kontrasten mellem prøven og baggrunden. Den kan detektere partikler ned til 4-200 nm. Det viser dog kun objekters tilstedeværelse, bevægelse og overfladetræk og kan ikke løse deres fine indre strukturer.
④ Driftsprocedurer
(1) Monter mørkfeltskondensatoren på mikroskopets kondensatorholder.
(2) Brug en skarp lyskilde. Undgå at direkte lys trænger ind i objektivet; en dedikeret mikroskoplampe bruges generelt.
(3) Anbring en dråbe cederolie mellem kondensatoren og objektglasset. Dette forhindrer total intern refleksion af lys på kondensatoroverfladen, som ellers ville undlade at oplyse prøven til observation i mørke felter.
(4) Hæv eller sænk kondensatoren for at fokusere dens koniske lysstråle på prøven. Hvis kondensatoren er udstyret med vandrette bevægelses- og centreringskontroller, skal du først udføre centrering for at justere kondensatorens optiske akse nøjagtigt med mikroskopets. (5) Vælg et objektiv, der passer til kondensatoren, juster fokus, og bring målprøvebilledet til syne.
