Den grundlæggende struktur af et mikroskop og hvordan en olielinse fungerer
Moderne generelle optiske mikroskoper bruger et system af to linser, et okular og en objektivlinse, til at forstørre billedet, og omtales ofte som sammensatte mikroskoper. De er sammensat af to hoveddele: den mekaniske enhed og det optiske system. I mikroskopets optiske system er objektivlinsens ydeevne den mest kritiske, hvilket direkte påvirker mikroskopets opløsning. Blandt de forskellige typer objektivlinser, der almindeligvis anvendes i almindelige optiske mikroskoper, har olielinsen den største forstørrelse og er den vigtigste for mikrobiologisk forskning. Sammenlignet med andre objektiver er brugen af olielinser mere speciel, du skal tilføje en dråbe spejlolie mellem objektglasset og linsen, hvilket hovedsageligt skyldes følgende to aspekter:
1. øge lysstyrken af belysningen af oliespejlet forstørrelse på op til 100 Χ, forstørrelse af en så stor linse, brændvidden er meget kort, diameteren er meget lille, men den krævede lysintensitet er den største. Fra at bære prøver af objektglasset gennem lyset, på grund af forskellig mediadensitet (fra objektglasset til luften og derefter ind i linsen), vil noget af lyset skyldes brydning eller total refleksion, kan ikke komme ind i linsen, hvilket resulterer i i brugen af oliespejlet vil skyldes mindre lys, fremstår objektbilledet ikke klart. Så for ikke at få lyset igennem tabet, skal der ved brug af oliespejl lægges mellem oliespejlet og glideren med glassets brydningsindeks (n=1.55) svarende til oliespejlet (normalt med cederolie, dens brydningsindeks n=1.52).
2. Øg opløsningen af mikroskopet Et mikroskops opløsning eller opløsningsevne er mikroskopets evne til at genkende minimumsafstanden mellem to punkter. Fra et fysisk synspunkt er opløsningen af et optisk mikroskop begrænset af interferensfænomenet og ydeevnen af den anvendte objektivlinse. Opløsningskraften D kan udtrykkes som følger: D=λ/2N.A, hvor λ=bølgelængde af lysbølgen; NA=numerisk blændeværdi for objektivlinsen. Optisk mikroskop lyskilde er ikke mulig ud over bølgelængdeområdet for synligt lys (0.4 - 0.7 μm), mens den numeriske blændeværdi afhænger af objektivlinsen i spejlmundingsvinklen og brydningen indeks for mediet mellem objektglasset og linsen, som kan udtrykkes som følger: NA=n × sin, hvori er halvdelen af lysets maksimale indfaldsvinkel. Det afhænger af objektivlinsens diameter og brændvidde, generelt kan maksimum i praksis kun nå 120 O og n for mediets brydningsindeks. Fordi brydningsindekset for cederolie (1,52) end brydningsindekset for luft og vand (henholdsvis 1.0 og 1.33) er højere, så cederolie som en linse i glidebilledet mellem mediet af oliespejl kan opnå den numeriske blændeværdi (NA er generelt i 1.2-1.4) til at være højere end linsen med lav forstørrelse, linsen med høj forstørrelse, såsom tørspejl (NA er lavere end 1. 0). Hvis den gennemsnitlige bølgelængde af synligt lys er 0.55 μm, kan en linse med høj forstørrelse med en numerisk blænde på 0.65 kun skelne objekter i en afstand på ikke mindre end 0. 4 μm, hvorimod opløsningen af et oliespejl kan være omkring 0,2 μm.
