Den korrekte brug af inverteret fluorescensmikroskopi
Inverteret fluorescensmikroskop er et multifunktionelt mikroskop, der bruges inden for avanceret biologisk videnskabelig forskning. Dens struktur er kompleks og dyr. Derfor, for at medicinske kandidatstuderende korrekt kan mestre driften og brugsstandarderne for inverteret fluorescensmikroskop, skal lærere først undervise i den grundlæggende viden om inverteret fluorescensmikroskop, før de demonstrerer den faktiske drift af inverteret fluorescensmikroskop. De bør introducere strukturen, princippet, funktionen og de grundlæggende brugsmetoder for inverteret fluorescensmikroskop og derefter demonstrere forskellige funktioner for forskellige prøver i specifikke brugsoperationer, gradvist gøre driften og brugen af inverteret fluorescensmikroskop standardiseret for medicinske kandidatstuderende.
1. Korrekt brug af visuel observation. En af funktionerne ved et inverteret fluorescensmikroskop er at observere i et lyst synsfelt. Dets grundlæggende princip er at opnå billeddannelse i en lys baggrund baseret på den forskellige lysabsorption af hver del af prøven efter at være blevet belyst af lys. Det er hovedsageligt velegnet til at observere farvede eller farvede celler, vævsskiver og andre prøver.
2. Korrekt brug af differentiel observation. Den anden funktion af inverteret fluorescensmikroskop er faseforskel observation. Dets grundlæggende princip er at konvertere den optiske vejforskel af forskellige dele af prøven til amplitudeforskel og observere gennem et faseforskelobjektiv med en faseplade og en spotlight med en cirkulær blænde. Det er hovedsageligt velegnet til at observere levende celler eller ufarvede vævsskiver. I processen med eksperimentel undervisning er det ud over at korrekt vejlede medicinske kandidatstuderende til at følge de grundlæggende betjeningsmetoder for faseforskelobservation vigtigere at guide dem til at forstå og mestre prøverne ved hjælp af faseforskelobservation. For dem er den mest anvendte metode i fremtidig videnskabelig forskning mikroskopisk observation af dyrkede celler. For det første, til valg af celleudstyr, anbefales det generelt at bruge kulturskåle, tallerkener og flasker lavet af glas og plastmaterialer. De er for det meste farveløse og gennemsigtige og kan observeres direkte under et omvendt fluorescensmikroskop uden behov for at hælde cellevæske ud eller gennemgå andre behandlinger. For det andet, under mikroskopisk observation, må du ikke åbne låget på udstyret tilfældigt for at undgå at forurene cellerne. Endelig, for operatører, bør handsker, masker og hvide frakker bæres for ikke kun at beskytte deres eget helbred, men også forhindre cellekontamination.
3. Korrekt brug af fluorescensobservation. Den tredje funktion af et inverteret fluorescensmikroskop er fluorescensobservation. Dets grundlæggende princip er at bruge excitationslys til at excitere prøven for at producere fluorescens, og derved opnå form- og positionsobservation af prøven. Det er hovedsageligt velegnet til at observere fluorescensmærkede prøver. Fluorescensobservation er en vigtig funktion af inverteret fluorescensmikroskopi med dyrt tilbehør og speciel brug. For at medicinske kandidatstuderende korrekt kan mestre driftsnormerne for fluorescensobservation, lærer lærere dem ikke kun de grundlæggende betjeningsmetoder, men endnu vigtigere, lærer dem det unikke ved det. For det første skal overfladen af objektglasset og dækglasset være glat, og tykkelsen skal være passende (glasset skal være mellem 0,8 mm og 1,2 mm, og dækglasset skal være omkring {{5) }}.17mm); Prøven skal have en passende tykkelse, samtidig med at celleoverlapning eller urenhedsmaskering undgås. Forseglingsmidlet skal bruge en lige blanding af glycerol og carbonatbuffer (0.5mol/L pH 9.0-9.5). For det andet, før fluorescensobservation, skal lysene i rummet og det hvide lys fra det omvendte fluorescensmikroskop slukkes for at sikre, at de er i et mørkt rummiljø. Endelig, ved fluorescensobservation, bør observationstiden være strengt kontrolleret, generelt 1-2 timer pr. gang, ellers vil fluorescens henfalde og forsvinde; Ved justering af lyskilden bør der bæres beskyttelsesbriller for at undgå UV-skader på glassene.
4. Korrekt brug af billedoptagelse. I videnskabelig forskning kræves det ikke kun, at inverteret fluorescensmikroskopi kan opnå flere observationer, men også at inverteret fluorescensmikroskopi kan opnå billedoptagelse. Det omvendte fluorescensmikroskopsystem kombinerer et optisk mikroskop med en computer gennem fotoelektrisk konvertering, hvilket giver mulighed for ikke kun mikroskopisk observation på okularet, men også real-time dynamisk billedobservation, redigering og lagring på computeren.
