Tre typer mikroskopobservationer
I. Lyst felt BF (lys felt BF)
Bright field BF er en velkendt metode til mikroskopi, som er meget brugt i patologi og test til observation af farvede snit, og alle mikroskoper er i stand til at udføre denne funktion.
Lyst felt
II. Mørkt felt DF (Mørkt felt DF)
Mørkfelt DF er faktisk mørkfeltbelysning. Det er forskelligt fra et lyst felt ved, at det ikke direkte observerer det oplyste lys, men det lys, der reflekteres eller diffrakteres fra objektet, der undersøges. Som et resultat bliver synsfeltet en mørk baggrund, mens det undersøgte objekt fremstår som et lyst billede.
Princippet om mørke synsfelt er baseret på Tyndall-fænomenet i optik, støv i tilfælde af stærkt lys gennem det direkte lys, kan det menneskelige øje ikke observeres, dette er på grund af det stærke lys omkring årsagen. Hvis lyset rettes skråt mod det, ser partiklerne ud til at stige i størrelse på grund af lysets refleksion og bliver synlige for det menneskelige øje.
Et særligt tilbehør, der kræves til observation i mørke felter, er et spotting-skop i mørke områder. Det er kendetegnet ved ikke at lade lysstrålen passere gennem det undersøgte objekt fra bund til top, men ved at ændre lysets vej, så det rettes skråt mod det undersøgte objekt, så det oplysende lys ikke trænger direkte ind i objektivlinse, og et lyst billede dannes ved at bruge det reflekterede eller diffrakterede lys fra overfladen af det undersøgte objekt. Opløsningen af mørkefeltsobservation er meget højere end lysfeltobservation, * op til 0.02-0.004
Darkfield
III. Fasekontrast PH
I udviklingen af optisk mikroskopi er den vellykkede opfindelse af fasekontrast PH en vigtig præstation inden for moderne mikroskopiteknologi. Som vi ved, kan det menneskelige øje kun skelne lysbølgernes bølgelængde (farve) og amplitude (lysstyrke), for farveløse og lyse biologiske prøver, når lyset passerer igennem, ændres bølgelængden og amplituden ikke meget, og det er svært at observere prøven i den lyse feltobservation.
Fasekontrastmikroskop bruger forskellen i lysområdet for det undersøgte objekt til mikroskopisk undersøgelse, det vil sige, det bruger effektivt lysinterferensfænomenet til at ændre det menneskelige øjes utydelige faseforskel til den skelnelige amplitudeforskel og endda farveløs og gennemsigtig stoffer kan blive tydeligt synlige. Dette letter i høj grad observationen af levende celler, så fasekontrastmikroskopi er meget udbredt i omvendte mikroskoper.
Det grundlæggende princip for fasekontrastmikroskopi er, at forskellen i optisk rækkevidde af synligt lys transmitteret gennem en prøve omdannes til en forskel i amplitude, hvilket øger kontrasten mellem forskellige strukturer og gør dem synlige. Lyset brydes gennem prøven og afviger fra den oprindelige lysbane, mens det forsinkes med 1/4λ (bølgelængde). Hvis 1/4λ øges eller mindskes igen, bliver den optiske områdeforskel 1/2λ, og interferensen mellem de to fotosyntesestråler forstærkes, efter at de to strålers akser er interfereret, og amplituden stiger eller falder, således forbedre kontrasten. I strukturen har fasekontrastmikroskop to specielle funktioner, som er forskellige fra almindelige optiske mikroskoper:
1. ringformet membran (ringformet membran) er placeret mellem lyskilden og kondensatoren, rollen er at få lyset gennem kondensatoren til at danne en hul lyskegle med fokus på prøven.
2. faseplade (ringformet faseplade) i objektivlinsen belagt med magnesiumfluorid faseplade, direkte eller diffrakteret lys kan forsinkes fase 1/4λ. Der er to slags:
1.A faseplade: det direkte lys forsinket 1/4 λ, to grupper af lysbølger koaksial lysbølgetilsætning, amplitudeforøgelse, prøvestrukturen end det omgivende medium er lysere, dannelsen af lys kontrast (eller negativ kontrast) .
2.B faseplade: det diffrakterede lys er forsinket med 1/4 λ, de to grupper af lysbølger efter sammensmeltningen af lysbølgens akse reduceres, amplituden bliver mindre, dannelsen af mørk kontrast (eller positiv kontrast ), strukturen er mørkere end det omgivende medium.
