Biologisk mikroskop vedrørende volumen af vævsblokke
Biologisk mikroskopi Indtil videre er koldfiksering, frosset ultratynde snit og frysetørring rutinemetoder til røntgenmikrosnit af væv og celler. Følgende er detaljerne i denne metode:
Biologiske mikroskoper. For mikroskoper med kondensator kan kondensatoren flyttes op og ned for at opnå moderat lysstyrke. Derudover kan blænden på de variable lysemitterende dioder ændres for at opnå moderat 9b lysstyrke. Hvis lyset er stærkt, kan kondensatoren hæves passende, og blænden på det variable lys kan forstørres passende. Hvis lyset er for stærkt, kan kondensatoren sænkes passende, og tværlysstrålens blænde kan reduceres passende. Hvis du stadig føler dig blændende under denne situation, kan du vælge et passende filter og placere det på beslaget under kondensatoren. På denne måde kan du få den lysstyrke, der tilfredsstiller dig. Det kræver selvfølgelig en vis periode med øvelse at få erfaring med at justere op og ned positionen af kondensatoren for at opnå variabel blændestørrelse og vælge passende filtre.
Et meget vigtigt emne i biologisk mikroskopi er, at under processen med opsamling og adskillelse af celler, efter frysetørring og harpiksindlejring (FD), efter frysning af ultratynde pellets og efter frysetørring, skal indholdet på 65 elementer i hver del analyseres meget omhyggeligt, og absolut ikke beskadige de celler, der skal analyseres. Fordi røntgenmikroområdeanalyse ikke kun involverer mange trin, men også koster meget. Hvis de analyserede celler efter lang tid og flere trin er beskadigede celler eller døde celler, ville det være en skam at drage forkerte konklusioner. For eksempel har kardiomyocytter isoleret efter collagenasebehandling to former, den ene er lang stavformet og den anden er rund. Sidstnævnte er døende celler, der bliver beskadiget under celleisolering.
Biologisk mikroskopi Indholdet og fordelingen af elektrolytter i disse to typer celler er meget forskellige. Na er meget højt, og K er meget lavt i runde kardiomyocytter, og Ca-koncentrationen i lineære grene er meget høj. Efter kontrol med andre analysemetoder blev det bevist, at det høje Na og det lave K i runde celler og det høje ca i mitokondrier skyldtes beskadigelsen af cellemembranen under celleadskillelsesprocessen. Den kolde fikseringsmetode for celler og væv er ofte først at slukke og fiksere dem og derefter opbevare dem i flydende nitrogen. Slukning og fiksering er meget vigtigt for konserveringseffekten. Levende celler eller friske væv er rige på vand. Ved quenching fryses og fikseres de dele af cellerne eller vævet, der er i direkte kontakt med kryogenet (især når de er quenchet med flydende nitrogen), og danner således en "skal", som hindrer den centrale del af cellerne blev knust. og koldfikseret. Når man laver X-line mikroarealanalyse, finder man derfor ofte ud af, at der er iskrystaller i midten af større celler. For at forhindre dette i at ske, bruges et stof med et højere smeltepunkt end flydende nitrogen men en lavere tørhed på -806c som det knuste kølemiddel. Der er mange sådanne stoffer, men den nemmeste og billigste er koncentreret propan (kogepunkt - 42.120c, smeltepunkt - 187.10c, molekylvægt 44.1), og afkølingshastigheden er også den hurtigste. Men dens ulempe er, at den er brandfarlig.
Biologisk mikroskop kan sætte muskelfiberen på en speciel ramme. Når muskelfiberkontraktionen når en vis fase og skal fikseres, startes dysen med det samme for at sprøjte flydende propan til muskelfiberen for at slukke og fiksere den. Derefter blev muskelfibrene sammen med rammen taget ud og lagt i flydende nitrogen. Hvis blodceller eller adskilte celler fikseres, centrifugeres først ved lav hastighed for at koncentrere cellerne, overføres cellerne til et lille sølvrør med god termisk ledningsevne, placeres røret i flydende propan og fryses for at fiksere det. Når du fikserer rottebugspytkirtlen i Hall-laboratoriet, skal du først forkøle de to stålblokke med flydende helium (eller flydende nitrogen), klemme de to kobberblokke med pincet og placere dem før og efter bugspytkirtlen for at slukke og fiksere livmoderkirtlen . Væv eller celler kan slukkes og fikseres og derefter overføres til flydende nitrogen til langtidsopbevaring.
