Hvert filters rolle i fluorescensmikroskopi
Det mest afgørende problem med fluorescensmikroskopi er kombinationen af filtre, og både excitationsfilteret og afskærmningsfilteret skal være egnet til det observerede fluorescerende legeme og matchet med hinanden. Til visse specifikke formål, hvis der er en fejl ved valg af et filter, kan det føre til misforståelser og endda forkerte resultater. Resultaterne af fluorescensmikroskopiteknologi og brugen af højkvalitetsfiltre og geniale filtergrupper er uadskillelige. Der findes flere typer filtre til fluorescensmikroskopi.
1. Varmeabsorberende filter
Varmeabsorberende filter er et nødvendigt filter for at forhindre termisk stråling i lyskildespektret i at beskadige den optiske enhedsgruppe. Tidlige avancerede mikroskoper var udstyret med tromleformede flasker, der kunne indeholde destilleret vand som varmeabsorberende anordninger. Moderne forskningsmikroskoper i stor skala er udstyret med varmeabsorberende glasfiltre i lyskilder eller -kamre, som er gennemsigtige, let gule glasplader. Leitz's KG1 (2 mm) og BG38 (4 mm) filtre kan transmittere næsten alle ultraviolette og synlige lysspektre, hvilket gør dem til filtre med en lysflux på op til 98%. Den absorberer kun selektivt infrarøde fototermiske strålingslinjer.
2. Excitationsfilter
Excitationsfiltre kan selektivt absorbere lange bølgelængdespektrallinjer og kun transmittere ultraviolet lys. Filtre til lilla, blåt og grønt lys er excitationsfiltre. Zeiss, Reichert, Olympus B-serien, G-serien, BG-serien, Shott UG-serien, Opton H, G, BP-serien, Leitz BP-serien og andre filtre er alle excitationsfiltre.
3. Blokerende filter
Blokeringsfilter er et filter, der selektivt absorberer spektrallinjer med korte bølgelængder og infrarød stråling, hvilket gør det muligt for observatøren at se fluorescensen, der udsendes af det objekt, der testes, samtidig med at hornhinden beskyttes mod UV-skader.
4. Farvelysseparationsfilter
Farvelysseparationsfilter er et filter, der reflekterer excitationslyset på objektet, der testes, hvilket får objektet til at udsende fluorescens og derefter transmittere fluorescensen til okularet. Denne type filter kan kun bruges i faldende strålekoncentratorer, mens transmissionslysfluorescensmikroskopi ikke kræver farveseparation.
5. Interferensfilter
Interferensfilter er en type højtydende excitationsfilter. Det er et filter lavet ved at stable flere tynde metalfilm mellem to polerede glasplader. Brydningsindekset for hver tynd metalfilm er forskelligt, så spektrallinjerne med forskellige bølgelængder af belysningslyskilden reflekteres gentagne gange på hver metalfilm, hvilket får nogle bølgelængder af spektrallinjer til at udligne på grund af destruktiv interferens, mens andre forstærkes af additiv interferens og transmitteres igennem. Dette resulterer i et filter med et smalt transmissionsspektrum, en halv spidsbredde på kun 6~20nm og en transmittans på 60%~70%.
